Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD4 di topo coniugato a PerCP/Cyanine5.5 per citometria a flusso - P06332

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del CD4

• Il bersaglio è il CD4 di topo (glicoproteina di superficie delle cellule T CD4), noto anche come L3T4 o Ly-4. Sono state riportate due isoforme generate da splicing alternativo, con l'isoforma 1 corrispondente alla sequenza canonica (UniProt P06332).
• Il CD4 è una glicoproteina integrale di membrana che funge da corecettore per le molecole MHC di classe II nelle cellule T, riconoscendo peptidi derivati da proteine extracellulari e svolgendo quindi un ruolo essenziale nell'immunità adattativa.
• In seguito al legame con i complessi MHC di classe II:peptide sulle cellule presentanti l'antigene, il CD4 interagisce simultaneamente con il recettore delle cellule T (TCR) e recluta la chinasi Src LCK al complesso TCR-CD3, avviando cascate di segnalazione che promuovono l'attivazione delle cellule T helper, la produzione di citochine e la proliferazione.
• Oltre alla segnalazione dipendente dal TCR, il CD4 contribuisce anche a funzioni indipendenti da TCR/LCK nei macrofagi e nelle cellule NK, influenzando la differenziazione, l'attivazione, l'espressione di citochine e la migrazione cellulare.
• Il CD4 è fondamentale per lo sviluppo delle cellule T helper nel timo ed è in grado di indurre la differenziazione dei monociti in macrofagi maturi funzionali.
• La proteina è espressa prevalentemente sulla membrana cellulare delle cellule T helper, specializzate nell'attivazione delle cellule T citotossiche, nella regolazione delle cellule B e nell'attivazione dei fagociti. È inoltre presente in altre cellule immunitarie, come macrofagi, cellule dendritiche e cellule NK.
• Le principali modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione legata all'N, la palmitoilazione, la fosforilazione e la presenza di ponti disolfuro, importanti per la stabilità strutturale e la funzione della proteina.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo comprende gli amminoacidi 27–394 del CD4 di topo (NP_038516.1), coprendo l'intero dominio extracellulare. Questo design favorisce il riconoscimento del CD4 nativo espresso sulla superficie cellulare.
• Questo anticorpo è validato per la citometria a flusso (FC) ed è fornito come coniugato a PerCP/Cyanine5.5, consentendo il rilevamento diretto del CD4 di topo su cellule vive senza la necessità di un anticorpo secondario.
• Quando si impostano esperimenti di citometria a flusso, si consiglia di titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di colorazione ottimale per il tipo cellulare e lo strumento specifici. Includere controlli isotipici appropriati e coloranti di vitalità per garantire un gating accurato.
• Poiché il CD4 è espresso sulle cellule T helper e su altre popolazioni immunitarie, verificare il profilo di colorazione nei tessuti o nei campioni cellulari murini pertinenti (ad esempio splenociti, timociti, PBMC) e valutare la co-colorazione con CD3 e CD8 per distinguere i sottogruppi di cellule T.

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