PolimAb® rabbit Phospho-ACC1/ACC2-S79 per WB, IF/ICC, ELISA - Q13085 / O00763

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'Acetil-CoA carbossilasi 1/2

• ACC1 (acetil-CoA carbossilasi 1, codificata da ACACA) è un enzima multifunzionale dipendente dalla biotina che catalizza la carbossilazione dell'acetil-CoA dipendente da ATP in malonil-CoA, il primo passaggio limitante della biosintesi de novo degli acidi grassi. Riferimenti correlati: PMID:20457939 PMID:20952656 PMID:29899443
• ACC2 (acetil-CoA carbossilasi 2, codificata da ACACB) è un'isoforma omologa che regola principalmente l'ossidazione degli acidi grassi; l'anticorpo riconosce un sito di fosforilazione conservato comune sia ad ACC1 che ad ACC2.
• L'enzima si localizza prevalentemente nel citoplasma / citosol.
• ACC1 è espresso nel cervello, placenta, muscolo scheletrico, rene, pancreas e tessuto adiposo; è presente a bassi livelli nel polmone e non viene rilevato nel fegato.
• Come fosfoproteina, la sua attività è modulata dalla fosforilazione su residui chiave come la Ser79 (numerazione di ACC1), collegando lo stato energetico cellulare al metabolismo lipidico.
• La proteina richiede la biotina come cofattore e lega ATP, Mg²⁺ o Mn²⁺; possiede un dominio portante della biotina carbossile essenziale per la sua funzione.
• Altre modifiche post-traduzionali includono l'acetilazione e l'enzima è soggetto a regolazione allosterica.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico corrispondente ai residui intorno alla Ser79; è quindi necessario includere inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare il segnale di fosforilazione.
• Per il Western blotting, tenere conto dell'elevato peso molecolare previsto (~265kDa); si consiglia di utilizzare gel SDS-PAGE a bassa percentuale, tempi di trasferimento estesi e marcatori di peso molecolare appropriati.
• Per IF/ICC, possono essere necessarie condizioni di fissazione e permeabilizzazione ottimizzate per ottenere una colorazione citoplasmatica efficace.
• Nell'esecuzione dell'ELISA, verificare la fosfo-specificità confrontando il legame con i peptide fosforilati rispetto a quelli non fosforilati o dopo il trattamento del campione con fosfatasi.

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