Anticorpo monoclonale di coniglio Phospho-Akt (S473) per WB, ELISA - P31749 / P31751 / Q9Y243

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di AKT (AKT1/AKT2/AKT3)

• AKT1 è una chinasi proteica serina/treonina e una delle tre isoforme AKT (AKT1, AKT2, AKT3) che mediano la segnalazione a valle di PI3K, regolando il metabolismo, la proliferazione, la sopravvivenza cellulare, la crescita e l'angiogenesi. Riferimenti correlati: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• Fosforila GSK3 per regolare la sintesi del glicogeno e la proliferazione cellulare e promuove l'assorbimento del glucosio mediando la translocazione indotta dall'insulina del trasportatore di glucosio GLUT4.
• AKT1 promuove la sopravvivenza cellulare fosforilando fattori pro-apoptotici, inclusi MAP3K5 (chinasi correlata al segnale di apoptosi), inibendo così l'apoptosi indotta da stress ossidativo. Riferimenti correlati: PMID:11154276
• Attraverso la fosforilazione di TSC2 a Ser-939 e Thr-1462, AKT attiva la via mTORC1, migliorando la sintesi proteica e la crescita cellulare. Riferimenti correlati: PMID:12150915 PMID:12172553
• AKT regola i fattori di trascrizione FOXO fosforilando FOXO1, FOXO3 e FOXO4, portando al loro trattenimento citoplasmatico e all'inibizione dell'espressione genica pro-apoptotica. Riferimenti correlati: PMID:10358075
• Modula la trascrizione dipendente da NF-kappa-B e fosforila CREB1, inducendo l'espressione di geni pro-sopravvivenza come BCL2 e MCL1. Riferimenti correlati: PMID:9829964
• AKT1 è localizzata nel citoplasma, nel nucleo, nella membrana cellulare e nello spazio intermembrana mitocondriale, riflettendo i suoi diversi ruoli funzionali.
• La proteina è ampiamente espressa nei tipi cellulari umani, con un'aumentata espressione e fosforilazione osservata durante la progressione del cancro alla prostata e al seno.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è prodotto contro un peptide fosforilato corrispondente a Ser473 di AKT1 umana; può riconoscere il sito di fosforilazione equivalente su AKT2 e AKT3 a causa della conservazione della sequenza.
• Per il Western blot, includere inibitori delle fosfatasi nei tamponi di lisi e considerare l'uso di un controllo trattato con fosfatasi per confermare la specificità fosfo-specifica.
• Pesi molecolari previsti: 48–55 kDa per le diverse isoforme AKT; il blocco con il fosfopeptide immunizzante può aiutare a verificare l'identità della banda.
• Per l'ELISA, ottimizzare la concentrazione dell'antigene di rivestimento e considerare l'abbinamento di anticorpi fosfo-specifici e totali per la normalizzazione.
• Validare le prestazioni nel sistema di campioni pertinente e nelle condizioni di trattamento (es. stimolazione con fattori di crescita o trattamenti con inibitori) prima dell'uso su larga scala.

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