Fosfo-AKT1-T308 coniglio pAb - P31749

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di AKT1

• AKT1 è un membro della famiglia delle chinasi serina/treonina AKT che media diversi processi cellulari, inclusi il metabolismo, la proliferazione, la sopravvivenza, la crescita e l'angiogenesi, fosforilando numerosi bersagli a valle. Riferimenti correlati: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136 PMID:21432781

• Gioca un ruolo centrale nella segnalazione dell'insulina promuovendo l'assorbimento del glucosio tramite il traslocamento di SLC2A4/GLUT4 e regolando la sintesi del glicogeno attraverso la fosforilazione inibitoria di GSK3A (Ser-21) e GSK3B (Ser-9).

• AKT1 promuove la sintesi proteica e la crescita cellulare fosforilando TSC2 a Ser-939 e Thr-1462, attivando così la via mTORC1. Riferimenti correlati: PMID:12150915 PMID:12172553

• Regola la sopravvivenza cellulare inibendo i fattori pro-apoptotici: fosforilando MAP3K5/ASK1 a Ser-83 per sopprimere l'apoptosi indotta da stress ossidativo e fosforilando BAD per inattivare la sua funzione pro-apoptotica. Riferimenti correlati: PMID:11154276 PMID:10926925

• AKT1 fosforila i fattori di trascrizione FOXO (FOXO1 a Thr-24, Ser-256, Ser-319; FOXO3 e FOXO4 in siti equivalenti), portando al loro trattenimento citoplasmatico e inattivazione, il che promuove la proliferazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:10358075

• A livello subcellulare, AKT1 si localizza nel citoplasma, nel nucleo, nella membrana cellulare e nello spazio intermembranale mitocondriale, coerente con i suoi molteplici ruoli di segnalazione.

• AKT1 è ampiamente espresso nei tessuti umani, con livelli proteici aumentati nei tumori della prostata e della mammella, in particolare la forma fosforilata a Tyr-176 che mostra un'espressione elevata durante la progressione del cancro al seno.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il western blotting, considerare l'utilizzo di lisati cellulari stimolati con insulina o trattati con fattori di crescita come controlli positivi, e includere sempre inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare la fosforilazione a Thr308.
• Convalidare la specificità confrontando il segnale con un anticorpo AKT1 totale e testare l'anticorpo nel sistema modello pertinente (umano, topo o ratto) per confermare la banda prevista a ~56 kDa.
• Per le applicazioni ELISA, verificare il rilevamento del peptide fosforilato rispetto alla controparte non fosforilata e ottimizzare empiricamente le concentrazioni di rivestimento e le diluizioni dell'anticorpo.

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