Anticorpo Policlonale di Coniglio Fosfo-AKT1-T308+AKT2-T309+AKT3-T305 per WB, ELISA - P31749 / P31751 / Q9Y243

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di AKT1

• AKT1 è una delle tre serina/treonina-proteine chinasi strettamente correlate (AKT1, AKT2, AKT3) che regolano il metabolismo, la proliferazione, la sopravvivenza cellulare, la crescita e l'angiogenesi. Riferimenti correlati: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• AKT1 fosforila oltre 100 substrati a valle, mediando gli effetti di fattori di crescita come insulina, IGF1, PDGF ed EGF. Riferimenti correlati: PMID:21432781 PMID:12176338 PMID:12964941
• Nel signaling insulinico, AKT1 promuove l'assorbimento del glucosio innescando la traslocazione di SLC2A4/GLUT4 e fosforila GSK3A/B per stimolare la sintesi del glicogeno.
• AKT1 regola la sopravvivenza cellulare fosforilando MAP3K5/ASK1 a Ser-83, inibendo l'apoptosi indotta da stress ossidativo. Riferimenti correlati: PMID:11154276
• AKT1 attiva mTORC1 fosforilando TSC2 a Ser-939 e Thr-1462, promuovendo così la sintesi proteica e la crescita cellulare. Riferimenti correlati: PMID:12150915 PMID:12172553
• AKT1 fosforila i fattori di trascrizione FOXO (FOXO1, FOXO3, FOXO4), portando al legame con 14-3-3 e al sequestro citoplasmatico, promuovendo la proliferazione e la sopravvivenza cellulare. Riferimenti correlati: PMID:10358075
• La localizzazione subcellulare include il citoplasma, il nucleo, la membrana cellulare e lo spazio intermembrana mitocondriale, con una traslocazione regolata a seconda degli stimoli.
• L'attivazione aberrante di AKT1 è associata al cancro; la sua espressione aumenta nei tumori della prostata e della mammella, e la fosforilazione a Tyr-176 correla con gli stadi di malignità.
• La fosforilazione a Thr-308 nel loop di attivazione è necessaria per l'attività chinasica di AKT1, e questo sito è conservato in AKT2 (Thr-309) e AKT3 (Thr-305).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato intorno a Thr-308 di AKT1 umano; si prevede che l'anticorpo riconosca le forme fosforilate di AKT1 (p-T308), AKT2 (p-T309) e AKT3 (p-T305).
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda intorno a 48–55 kDa a seconda dell'isoforma e delle modifiche post-traduzionali; considerare l'uso di inibitori della fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare le fosforilazioni.
• Convalidare la specificità dell'anticorpo trattando i campioni con fosfatasi lambda o utilizzando il blocco con peptide non fosforilato.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per rilevare AKT fosforilato in lisati cellulari; titolare l'anticorpo e utilizzare controlli appropriati per le proteine fosforilate e totali.
• La reattività incrociata è indicata per umano e topo; specie aggiuntive potrebbero richiedere una validazione empirica.

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