Anticorpo monoclonale di coniglio Phospho-AKT1S1/PRAS40-T246 per WB, ELISA - Q96B36

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di AKT1S1/PRAS40

• Il substrato 1 ricco di prolina di AKT1 (AKT1S1), comunemente indicato come PRAS40 (substrato di AKT ricco di prolina di 40 kDa), è codificato dal gene AKT1S1 nell'uomo.
• AKT1S1 agisce come un regolatore negativo chiave del complesso 1 del bersaglio meccanicistico della rapamicina (mTORC1), un sensore di nutrienti centrale che promuove la crescita cellulare e l'accumulo di biomassa. Inibisce direttamente l'attività di mTORC1 bloccando il sito di reclutamento del substrato della chinasi MTOR. Riferimenti correlati: PMID:17277771, PMID:17386266, PMID:17510057, PMID:29236692
• In risposta all'insulina e ai nutrienti, AKT1S1 si dissocia da mTORC1, alleviando l'inibizione e permettendo alla segnalazione mTORC1 di procedere, un processo strettamente legato al suo stato di fosforilazione e all'associazione con le proteine 14-3-3. Riferimenti correlati: PMID:17386266, PMID:18372248, PMID:16174443
• Localizzato prevalentemente nel citoplasma e nel citosol, AKT1S1 è ampiamente espresso nei tessuti, con i livelli più alti osservati nel fegato e nel cuore. Si noti che la sua espressione è spesso elevata nelle linee cellulari tumorali come A-549 e HeLa rispetto alle linee cellulari normali.
• La proteina subisce multiple modificazioni post-traduzionali, tra cui fosforilazione in diversi residui e metilazione, ed è soggetta a splicing alternativo, contribuendo alla sua regolazione funzionale.
• Oltre alla segnalazione metabolica, AKT1S1 potrebbe svolgere un ruolo nella neuroprotezione mediata dal fattore di crescita nervoso, sebbene questa funzione sia principalmente dedotta per similarità con altre specie.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è stato generato utilizzando un fosfopeptide sintetico corrispondente al sito di fosforilazione Thr246. Per mantenere il rilevamento fosfo-specifico, considerare l'uso di inibitori delle fosfatasi durante i passaggi di lisi cellulare/di tessuto e di immunoprecipitazione.
• Per il western blot (WB), ci si aspetta una banda proteica di circa 27 kDa in base al peso molecolare calcolato di AKT1S1.
• Quando si esegue l'ELISA, appropriati controlli con peptide bloccante e peptide fosforilato/non fosforilato possono aiutare a confermare la specificità per la forma fosforilata in T246.
• Data l'espressione ubiquitaria e la fosforilazione condizionale di AKT1S1, si raccomanda di validare le prestazioni dell'anticorpo nel sistema di campioni rilevante (ad es., cellule stimolate con insulina rispetto a cellule in carenza).

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