Anticorpo policlonale coniglio Phospho-AMPKα1-S485 per WB, ELISA - Q13131

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di AMPKα1

• AMPKα1, codificato dal gene PRKAA1, funge da subunità catalitica della proteina chinasi attivata dall'AMP (AMPK), un sensore di energia cellulare. In seguito alla riduzione dei livelli di ATP, AMPK ripristina l'equilibrio energetico attivando le vie cataboliche e sopprimendo i processi biosintetici.
  Riferimenti correlati: PMID:17307971, PMID:17712357

• Nel metabolismo lipidico, AMPKα1 fosforila e inattiva enzimi chiave tra cui acetil-CoA carbossilasi (ACACA/ACACB) e HMG-CoA reduttasi (HMGCR), inibendo così la sintesi degli acidi grassi e del colesterolo. Promuove anche la lipolisi tramite la fosforilazione di CHKA (CHKalpha2).
  Riferimenti correlati: PMID:17307971, PMID:17712357, PMID:34077757

• Per l'omeostasi del glucosio, AMPKα1 stimola l'assorbimento di glucosio mediando la traslocazione di GLUT4 e regola la gluconeogenesi attraverso la fosforilazione di coattivatori della trascrizione come CRTC2/TORC2 e FOXO3.
  Riferimenti correlati: PMID:11518699, PMID:11554766

• AMPKα1 regola negativamente la segnalazione mTORC1 fosforilando TSC2 e RPTOR, portando alla soppressione della crescita e della proliferazione cellulare in condizioni di privazione di nutrienti.
  Riferimenti correlati: PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076

• Promuove l'autofagia fosforilando e attivando il complesso chinasico ULK1 e WDR45/WIPI4, critici per la formazione degli autofagosomi.
  Riferimenti correlati: PMID:21205641, PMID:28561066

• AMPKα1 si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nei endosomi tardivi, riflettendo i suoi ruoli nella trasduzione del segnale, nella regolazione trascrizionale e nel traffico vescicolare.

• AMPKα1 è una fosfoproteina; la sua fosforilazione nell'anello di attivazione a Thr172 è essenziale per l'attività chinasica. Questo anticorpo rileva specificamente la fosforilazione alla serina 485, un sito implicato nell'inibizione di AMPK in determinate condizioni.

• La proteina è nota anche come chinasi dell'acetil-CoA carbossilasi, chinasi della reduttasi dell'idrossimetilglutaril-CoA e chinasi della proteina Tau PRKAA1. Partecipa a processi aggiuntivi tra cui il ritmo circadiano, la segnalazione Wnt e le interazioni ospite-virus.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo policlonale di coniglio è stato prodotto contro un peptide fosforilato sintetico corrispondente alla Ser485 di PRKAA1 umano; ci si aspetta che rilevi l'AMPKα1 endogeno fosforilato a S485 in campioni umani, murini e di ratto tramite western blotting.
• Per le applicazioni WB, considerare l'uso di cocktail di inibitori delle fosfatasi durante la lisi per preservare la fosforilazione e validare la specificità della banda utilizzando controlli trattati con fosfatasi.
• Per l'ELISA, l'abbinamento con un anticorpo di cattura totale AMPKα1 può consentire il rilevamento a sandwich del fosforo-AMPKα1; ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevamento per il proprio saggio.
• Poiché la dinamica della fosforilazione S485 può variare tra i tipi cellulari e gli stimoli, confermare le prestazioni dell'anticorpo nel modello sperimentale specifico.

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