Fosfo-AMPKα1-T183+AMPKα2-T172 Anticorpo monoclonale di coniglio - Q13131 / P54646

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di AMPKα

• AMPKα1 (PRKAA1) e AMPKα2 (PRKAA2) sono le due isoforme della subunità catalitica alfa del complesso eterotrimerico AMPK, che contiene anche subunità regolatorie beta e gamma.
• Subunità catalitica di AMPK, una proteina chinasi sensore energetico che attiva le vie produttrici di energia e inibisce i processi consumatori di energia (es. biosintesi di proteine, carboidrati, lipidi) per mantenere l'omeostasi energetica cellulare.
  Riferimenti correlati:
  PMID:17307971 PMID:17712357 PMID:24563466
• Regola il metabolismo lipidico promuovendo la lipolisi tramite fosforilazione di CHKA (PubMed:34077757) e inattivando enzimi biosintetici lipidici come ACACA, ACACB e HMGCR (Per similarità).
  Riferimenti correlati:
  PMID:34077757
• Fosforila regolatori trascrizionali chiave (es. CRTC2, FOXO3, HDAC5, MEF2C, MLXIPL, p53) e l'istone H2B per modulare l'espressione genica legata al metabolismo energetico e alle risposte allo stress.
  Riferimenti correlati:
  PMID:11518699 PMID:11554766 PMID:15866171
• Agisce come un regolatore negativo critico del complesso di segnalazione mTORC1 fosforilando RPTOR, TSC2 e WDR24, e promuove l'autofagia attivando ULK1 e WDR45 in condizioni di limitazione di nutrienti.
  Riferimenti correlati:
  PMID:14651849 PMID:18439900 PMID:20160076 PMID:21205641 PMID:28561066 PMID:36732624 PMID:37079666
• Inoltre, AMPKα1 fosforila CASP6 per prevenirne l'attivazione (PubMed:32029622), regola il rimodellamento del citoscheletro di actina (PubMed:17486097) e modula la frammentazione mitocondriale e il reclutamento di ALDH7A1 in condizioni di stress.
  Riferimenti correlati:
  PMID:32029622 PMID:17486097 PMID:36367943 PMID:31492851 PMID:40233740
• A livello subcellulare, AMPKα1 si localizza nel citoplasma, nel nucleo e negli endosomi tardivi, coerente con i suoi ampi ruoli regolatori.
• Caratterizzata come una serina/treonina-proteina chinasi, fosfoproteina e glicoproteina, con splicing alternativo riportato.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'anticorpo è stato generato contro un peptide fosfo-sintetico che comprende i siti di fosforilazione del loop di attivazione (Thr183 in AMPKα1 e Thr172 in AMPKα2), rendendolo specifico per le forme attive e fosforilate di AMPKα.
• Per il Western blot, si osservano bande attese a circa 64 kDa (AMPKα1) e 62/65 kDa (AMPKα2); l'inclusione di inibitori della fosfatasi durante la preparazione del campione è fondamentale per preservare la fosforilazione.
• Convalidare la specificità di rilevamento trattando i lisati con λ‑fosfatasi o mediante inibizione competitiva con il peptide non‑fosforilato nel vostro sistema di campioni rilevante (es. linee cellulari umane, di topo o di ratto).
• Le applicazioni ELISA potrebbero richiedere l'ottimizzazione della concentrazione dell'antigene di rivestimento e delle condizioni di rilevamento a causa della natura peptidica dell'immunogeno.
• Nota che l'anticorpo è validato per WB ed ELISA; le prestazioni in altre applicazioni come IHC, IF o IP dovrebbero essere testate empiricamente.

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