Anticorpo policlonale di coniglio fosfo-AMPKa1-T183/AMPKa2-T172 per WB, ELISA - Q13131 / P54646

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di AMPKα1/AMPKα2

• La subunità catalitica alfa-1 della proteina chinasi 5'-AMP-attivata (AMPKα1, codificata da PRKAA1) funziona come il principale sensore energetico nelle cellule eucariotiche, fosforilando una vasta gamma di substrati per orchestrare l'adattamento metabolico. Riferimenti correlati: PMID:17307971, PMID:17712357, PMID:24563466
• Inibisce le vie anaboliche tra cui la biosintesi di proteine, carboidrati e lipidi, mentre promuove i processi catabolici come l'ossidazione degli acidi grassi e l'assorbimento del glucosio, in parte attraverso la fosforilazione diretta di enzimi metabolici come ACACA e HMGCR.
• AMPKα1 regola anche l'espressione genica fosforilando i regolatori della trascrizione (es. CRTC2, FOXO3, SREBF1), influenzando la gluconeogenesi, il metabolismo lipidico e le risposte allo stress. Riferimenti correlati: PMID:11518699, PMID:11554766, PMID:15866171
• Al di là del metabolismo, AMPKα1 controlla la crescita cellulare e l'autofagia attraverso l'inibizione di mTORC1 (fosforilando RPTOR, TSC2, FNIP1) e l'attivazione di ULK1, garantendo la sopravvivenza in condizioni di stress nutrizionale. Riferimenti correlati: PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:21205641, PMID:37079666
• Localizzata nel citoplasma, nel nucleo e negli endosomi tardivi, AMPKα1 si sposta dinamicamente per fosforilare bersagli in più compartimenti, collegando la localizzazione subcellulare alla specificità funzionale.
• AMPKα1 è una serina/treonina chinasi e fosfoproteina, con attività strettamente controllata dalla fosforilazione, in particolare in residui all'interno dell'ansa di attivazione; subisce anche ubiquitinazione e acetilazione.
• Lo splicing alternativo produce più isoforme, che possono contribuire alla regolazione tessuto-specifica e a risultati di segnalazione distinti.
• La strettamente correlata AMPKα2 (PRKAA2, SWISS P54646) condivide un'elevata omologia ed è anche rilevata da questo anticorpo, consentendo l'analisi combinata di entrambe le subunità catalitiche.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico corrispondente ai residui intorno alla Thr183 della PRKAA1 umana. Questo anticorpo è adatto per rilevare livelli endogeni di AMPKα1 e AMPKα2 fosforilati nel Western blotting, con bande attese intorno a 64 kDa (AMPKα1) e 62–65 kDa (AMPKα2).
• Per il Western blotting, si consiglia di utilizzare buffer di lisi specifici per fosforilazione integrati con inibitori di fosfatasi per preservare l'epitopo fosforilato e ottimizzare l'intensità del segnale.
• Nelle applicazioni ELISA, l'anticorpo può funzionare come reagente di cattura o di rilevazione; includere controlli di peptide fosforilato e convalidare le prestazioni rispetto alle controparti non fosforilate per garantire la specificità.
• La reattività crociata con campioni di topo e ratto è prevista in base all'elevata conservazione della sequenza intorno ai siti di fosforilazione, ma verificare sempre la rilevazione nella matrice del campione specifico e nelle condizioni sperimentali utilizzate.

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