Anticorpo monoclonale di coniglio Phospho-ASK1-T845 per WB, DB, ELISA - O35099

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ASK1

• La chinasi 5 attivata da mitogeno chinasi chinasi (MAP3K5), anche designata come chinasi 1 regolatrice del segnale di apoptosi (ASK-1) o chinasi chinasi 5 di MEK (MEKK5), è una chinasi serina/treonina codificata dal gene Map3k5 nel topo.
• Funziona come componente centrale della cascata di trasduzione del segnale della MAP chinasi, traducendo segnali ambientali in decisioni cellulari che coinvolgono differenziazione, sopravvivenza e apoptosi.
• Svolge un ruolo critico nella via apoptotica dipendente dai mitocondri attraverso l'attivazione delle caspasi, rispondendo a vari stimoli di stress.
• Essenziale per le risposte immunitarie innate; media la segnalazione innescata da stress ossidativo, TNF e LPS, portando all'attivazione delle vie MKK4/MKK7–JNK e MKK3/MKK6–p38 MAPK.
• Si localizza prevalentemente nel citoplasma e nel reticolo endoplasmatico.
• Esprime ampiamente nei tessuti di topo adulto, inclusi cuore, cervello, polmone, fegato e rene.
• La proteina è soggetta a fosforilazione, metilazione e ubiquitinazione; la fosforilazione di Thr845 è un evento chiave di attivazione in risposta allo stress.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'anticorpo è generato contro un peptide fosfo-sintetico che comprende il Thr845 di ASK1 di topo, fornendo un'elevata specificità per la forma attivata di questa chinasi.
• Nel western blot, ci si aspetta una banda prominente a circa 155 kDa; è opportuno includere marcatori di peso molecolare pre-colorati per confermare la dimensione della banda.
• Per una rilevazione robusta del fosfo‑ASK1 endogeno, stimolare le cellule con uno stressore appropriato (ad es., stress ossidativo o TNFα) e includere inibitori delle fosfatasi nei tamponi di lisi e reazione.
• Il prodotto è adatto per applicazioni di dot‑blot e ELISA; quando si utilizzano questi formati, ottimizzare le condizioni di blocco e lavaggio per minimizzare il fondo.
• Come per qualsiasi anticorpo specifico per la fosforilazione, confermare la specificità del segnale trattando i campioni con λ‑fosfatasi per verificare la perdita di immunoreattività.

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