Fosfo-ATF2 (T69/T71) Anticorpo policlonale di coniglio per WB, IHC-P, ELISA - P15336

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ATF2

• Il fattore di trascrizione attivante 2 (ATF-2), noto anche come HB16, CREB2, TREB7 o CRE-BP1, è un membro della famiglia di fattori di trascrizione ATF/CREB. Il gene subisce splicing alternativo, producendo più isoforme.
• ATF-2 funziona come attivatore trascrizionale legandosi alle sequenze consenso CRE (elemento di risposta cAMP, 5'-TGACGTCA-3') o AP-1 (proteina attivatrice 1, 5'-TGACTCA-3'), regolando geni coinvolti nell'anti-apoptosi, crescita cellulare, proliferazione e risposta al danno al DNA.
• La localizzazione subcellulare include nucleo, citoplasma e membrana mitocondriale esterna, consentendo funzioni dipendenti dal contesto nella trascrizione, regolazione mitocondriale e apoptosi.
• Nel citoplasma, ATF-2 interagisce con l'esochinasi-1 (HK1) e il canale anionico dipendente dal voltaggio 1 (VDAC1) sulla membrana mitocondriale esterna, alterando il potenziale di membrana mitocondriale e promuovendo la morte cellulare.
• La fosforilazione in Thr69 e Thr71 da parte della chinasi ATM è cruciale per la risposta al danno al DNA. ATF-2 fosforilato partecipa al controllo del checkpoint della fase S indotto da radiazioni ionizzanti (IR) e recluta il complesso MRN nei foci indotti da IR.
• ATF-2 mostra un'attività intrinseca di istone acetiltransferasi (HAT), acetilando specificamente in vitro gli istoni H2B e H4, collegando la regolazione trascrizionale alla modificazione della cromatina. Riferimenti correlati: PMID:10821277
• ATF-2 può mostrare attività oncogeniche o soppressore tumorali a seconda del tessuto e del contesto cellulare. È espresso ubiquitariamente, con livelli relativamente più alti nel cervello.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blot, considerare l'uso di campioni proteici freschi con inibitori delle fosfatasi per preservare la fosforilazione. Includere un controllo non fosforilato per confermare la specificità fosfo.
• Nell'IHC-P, potrebbero essere necessari metodi di recupero dell'antigene; titolare l'anticorpo per minimizzare il fondo e validare utilizzando tessuto noto per esprimere fosfo-ATF2.
• Per l'ELISA, rivestire le piastre con l'immunogeno fosfo-peptidico come controllo positivo e, se necessario, validare la reattività crociata contro il peptide non fosforilato.
• Data la reattività crociata con topo e ratto, verificare l'allineamento della sequenza della regione immunogena e validare le prestazioni nelle relative specie e modelli tissutali.

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