Anticorpo monoclonale coniglio Phospho-ATM-S1981 per WB, IF-P, ELISA - Q13315

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ATM

• ATM è una proteina chinasi serina/treonina che agisce come sensore primario del danno al DNA, riconoscendo le rotture a doppio filamento e attivando la segnalazione dei checkpoint, l'apoptosi e le vie di riparazione del DNA. Riferimenti correlati: PMID:10550055 PMID:10839545 PMID:10910365
• Riconosce la sequenza consenso del substrato [ST]-Q e fosforila numerosi bersagli critici, tra cui H2AX (Ser139), CHEK2, p53, BRCA1 e molte proteine di riparazione del DNA, coordinando così l'arresto del ciclo cellulare e la risposta al danno. Riferimenti correlati: PMID:10550055 PMID:10766245 PMID:10802669
• ATM si localizza nel nucleo, nelle vescicole citoplasmatiche, nel centrosoma e nei perossisomi, dimostrando il suo coinvolgimento non solo nella riparazione del DNA nucleare ma anche in processi citoplasmatici come il traffico vescicolare e la pexofagia. Riferimenti correlati: PMID:26344566
• È espresso ubiquitariamente in un'ampia gamma di tessuti, tra cui pancreas, rene, muscolo scheletrico, fegato, polmone, cervello e organi linfoidi, in linea con il suo ruolo fondamentale nella stabilità del genoma.
• ATM è una fosfoproteina con molteplici siti di fosforilazione; modifiche chiave regolano la sua attività chinasi e il suo reclutamento nei siti di danno al DNA; subisce anche acetilazione.
• Mutazioni con perdita di funzione in ATM causano l'atassia teleangectasia, una malattia multisistemica caratterizzata da neurodegenerazione progressiva, immunodeficienza e predisposizione al cancro.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• A causa dell'alto peso molecolare di ATM (351 kDa), per il Western blotting si consigliano tempi di trasferimento prolungati o tamponi di trasferimento modificati per garantire un trasferimento efficiente della proteina.
• Per la rilevazione di ATM fosforilato, aggiungere inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare il segnale di fosforilazione su S1981.
• Negli esperimenti di immunoprecipitazione (IP/IF-P), validare la specificità dell'anticorpo utilizzando agenti induttori di danno al DNA (es. radiazione ionizzante) per stimolare la fosforilazione di ATM.
• Per l'ELISA, stabilire le diluizioni ottimali di rivestimento e dell'anticorpo utilizzando controlli di fosfopeptido fosforilato ricombinante per garantire la selettività per la forma fosforilata S1981.

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