Anticorpo Policlonale di Coniglio Phospho-Beclin 1 (Ser15) per WB ed ELISA - Q14457

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Beclin-1

• Beclin-1 (noto anche come proteina a coil-coil simile alla miosina interagente con BCL2, ATG6 o VPS30) è una proteina centrale dell'autofagia codificata dal gene BECN1.
• Beclin-1 è una proteina autofagica centrale che funziona come subunità fondamentale del complesso PI3K di classe III, mediando la produzione di fosfatidilinositolo 3-fosfato. Riferimenti correlati: PMID:18570871 PMID:21358617 PMID:23184933
• È essenziale per la formazione di distinti complessi PI3K: PI3KC3-C1 per l'inizio dell'autofagosoma e PI3KC3-C2 per la maturazione dell'autofagosoma e l'endocitosi. Riferimenti correlati: PMID:20208530 PMID:20643123 PMID:23974797
• Beclin-1 è coinvolto nel traffico endocitico e nella fase di abscissione della citochinesi. Riferimenti correlati: PMID:25275521
• Un frammento mitocondriale di 35 kDa di Beclin-1 promuove l'apoptosi inducendo la traslocazione di BAX e il rilascio di fattori pro-apoptotici.
• Si localizza in molteplici organelli: citoplasma, Golgi, endosomi, reticolo endoplasmatico, mitocondri, autofagosomi e nucleo, in linea con i suoi ruoli nel traffico di membrana.
• Beclin-1 protegge dall'infezione da virus Sindbis neurovirulento, indicando un ruolo nella difesa antivirale.
• Beclin-1 subisce varie modificazioni post-traduzionali, inclusa la fosforilazione a Ser15, acetilazione e ubiquitinazione, che ne regolano le funzioni.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico specifico per Ser15 di Beclin-1 umano. Per confermare la specificità fosfo, considerare campioni trattati con fosfatasi o saggi di competizione con peptide nel proprio setup sperimentale.
• Per il Western blot, è attesa una banda intorno a 52 kDa. Ottimizzare utilizzando gel a gradiente e condizioni di trasferimento adatte per proteine di questo peso molecolare.
• Per l'ELISA, il rivestimento diretto dell'antigene fosfopeptidico può aiutare a valutare il legame dell'anticorpo; ottimizzare i buffer di rivestimento e le condizioni di bloccaggio per il proprio formato di piastra.
• È indicata reattività crociata con Beclin-1 di topo e ratto; pertanto, linee cellulari o lisati tissutali di queste specie possono essere utilizzati per studi funzionali sull'autofagia.
• La fosforilazione di Beclin-1 può essere transitoria; includere inibitori delle fosfatasi nei buffer di lisi e processare i campioni rapidamente per preservare l'epitopo fosfo.

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