Fosfo-BRD4-T249 Coniglio pAb per WB - O60885

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di BRD4

• BRD4 (Proteina contenente il dominio bromodominio 4, nota anche come HUNK1) è un lettore della cromatina che riconosce e si lega agli istoni acetilati, svolgendo un ruolo chiave nella trasmissione della memoria epigenetica attraverso le divisioni cellulari e nella regolazione della trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:20871596 PMID:23086925 PMID:23317504
• Rimane associato alla cromatina acetilata durante l'intero ciclo cellulare, preservando lo stato della cromatina acetilata e mantenendo la struttura cromatinica di ordine superiore per la trascrizione genica post-mitotica in G1. Riferimenti correlati: PMID:22334664 PMID:23317504 PMID:23589332
• Durante l'interfase, BRD4 regola la trascrizione dei geni inducibili da segnali reclutando il complesso P-TEFb ai promotori e agli enhancer distali, facilitando la fosforilazione del CTD della RNA polimerasi II e l'allungamento produttivo. Riferimenti correlati: PMID:16109376 PMID:16109377 PMID:19596240
• BRD4 si lega a RELA acetilata per attivare la segnalazione NF-kappa-B e, a seguito della fosforilazione da parte di CK2, viene reclutato ai promotori bersaglio di p53/TP53 per regolare la trascrizione mediata da p53. Riferimenti correlati: PMID:19103749 PMID:23317504
• Nella risposta al danno al DNA, BRD4 agisce come un isolatore cromatinico reclutando il complesso condensina-2 agli istoni acetilati, limitando la diffusione della fosforilazione dell'istone H2AX.
• Espresso ubiquitariamente e localizzato nel nucleo e nella cromatina.
• Modificato post-traduzionalmente per acetilazione e fosforilazione; contiene due bromodomini; coinvolto in riarrangiamenti cromosomici legati al cancro; interagisce con proteine virali.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato attorno a Thr249 di BRD4 umano. Per confermare la specificità della fosforilazione, considerare l'uso di un anticorpo BRD4 non specifico per la fosforilazione come controllo in esperimenti paralleli.
• Per il western blotting (WB), è prevista una banda di circa 152 kDa. Utilizzare una percentuale di gel appropriata (es. poliacrilamide all'8%) e ottimizzare le condizioni di trasferimento per proteine ad alto peso molecolare.
• Validare l'anticorpo in una linea cellulare rilevante (es. HeLa, Jurkat) con stato di fosforilazione BRD4 noto. Includere cocktail di inibitori delle fosfatasi nei tamponi di lisi per preservare i segnali di fosforilazione.
• Dato che è riportata la reattività incrociata per mouse e ratto, questo anticorpo potrebbe essere adatto per studi su modelli roditori; includere appropriati controlli positivi specifici per la specie per la verifica.

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