mAb coniglio anti Fosfo-CDK1-Y15 per WB, ELISA - P06493

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CDK1

• Ciclin-dipendente chinasi 1 (CDK1), nota anche come CDC2 o proteina chinasi p34, è una serina/treonina proteina chinasi che svolge un ruolo fondamentale nel ciclo cellulare eucariotico, promuovendo la transizione G2-M e l'inizio della mitosi (PubMed:16407259, PubMed:16933150, PubMed:17459720). Riferimenti correlati: PMID:16407259 PMID:16933150 PMID:17459720
• Phosphoryla un ampio spettro di substrati, tra cui lamine, istone H1, tau e vimentina, per orchestrare la separazione dei centrosomi, la rottura dell'involucro nucleare e la condensazione dei cromosomi (PubMed:16407259, PubMed:16933150, PubMed:17459720, PubMed:18480403, PubMed:20360007, PubMed:2188730). Riferimenti correlati: PMID:16407259 PMID:16933150 PMID:17459720 PMID:18480403 PMID:20360007 PMID:2188730
• L'attività di CDK1 è strettamente regolata da fosforilazione/defosforilazione presso i siti Thr14 e Tyr15. La fosforilazione della Tyr15 mediata da WEE1 e PKMYT1 inibisce CDK1, mentre le fosfatasi CDC25 rimuovono questo fosfato inibitore per promuovere l'ingresso in mitosi (PubMed:18480403, PubMed:20360007, PubMed:2188730, PubMed:20395957). Riferimenti correlati: PMID:18480403 PMID:20360007 PMID:2188730 PMID:20395957
• In risposta al danno del DNA, CDK1 viene fosforilata alla Tyr15 e inibita, determinando l'arresto in fase G2 per consentire la riparazione del DNA; dopo il completamento della riparazione, la fosfatasi WIP1 riattiva CDK1 (PubMed:20360007, PubMed:20395957). Riferimenti correlati: PMID:20360007 PMID:20395957
• CDK1 si localizza nel nucleo, nel citoplasma, nei mitocondri, al centrosoma e nel fuso mitotico, riflettendo i suoi molteplici ruoli nella mitosi.
• Si trova a livelli elevati nei tessuti tumorali mammari, rendendolo un potenziale bersaglio diagnostico e terapeutico.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico che comprende Tyr15 di CDK1 umana; pertanto, l'anticorpo riconosce specificamente la forma fosforilata.
• Per Western blotting, aspettarsi una banda a ~34 kDa. Utilizzare inibitori di fosfatasi nel buffer di lis per preservare la fosforilazione.
• La specificità può essere verificata trattando i campioni con lambda fosfatasi o eseguendo saggi di competizione peptidica con il peptide fosforilato e non fosforilato.
• Questo anticorpo è validato per campioni umani; la reattività crociata con altre specie non è stata determinata.
• Per ELISA, si consiglia di utilizzare il fosfopeptide come antigene di cattura e un anticorpo anti CDK1 totale per la rivelazione e la normalizzazione.

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