mAb coniglio anti Phospho-CDK2-Y15 per WB, ELISA - P24941

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CDK2

• La ciclina-dipendente chinasi 2 (CDK2), nota anche come proteina chinasi p33, è una serina/treonina proteina chinasi essenziale per il controllo del ciclo cellulare; non è necessaria per la mitosi, ma lo è per la meiosi. Riferimenti bibliografici: PMID:10499802 PMID:10884347
• Agisce nella transizione G1-S per promuovere il programma trascrizionale E2F e l'inizio della sintesi del DNA, e modula la progressione della fase G2; attiva la ciclina B/CDK1 per controllare l'ingresso in mitosi. Riferimenti bibliografici: PMID:18372919 PMID:19238148 PMID:19561645
• Fosforila molteplici substrati tra cui RB1, BRCA2, MYC e EZH2, regolando la replicazione del DNA, la riparazione del DNA, la trascrizione e il silenziamento epigenetico. Riferimenti bibliografici: PMID:10499802 PMID:19966300 PMID:20935635
• Innesca la duplicazione dei centrosomi e del DNA fosforilando NPM1, causandone la dissociazione dai centrosomi e iniziando la duplicazione. Riferimenti bibliografici: PMID:11051553
• È presente nel nucleo, nel corpo di Cajal, nel centrosoma, nel citoplasma e nell'endosoma, il che riflette i suoi diversi ruoli regolatori.
• È coinvolto nel checkpoint di danno al DNA in G1-S; fosforila BRCA2 e NBN per regolare la riparazione dipendente dalla ricombinazione omologa e il mantenimento dei telomeri. Riferimenti bibliografici: PMID:15800615 PMID:21319273 PMID:28216226
• Modifiche post-traduzionali come l'acetilazione, la fosforilazione in Tyr15 (inibitoria), in siti Ser/Thr e la S-nitrosilazione regolano in modo fine la sua attività e le sue interazioni.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico corrispondente alla regione intorno a Tyr15; utilizzare inibitori di fosfatasi durante la preparazione dei campioni per preservare lo stato di fosforilazione.
• Per Western blot, è attesa una banda di ~34 kDa; validare nel proprio sistema cellulare/tissutale con controlli positivi trattati con inibitori di fosfatasi o attivatori specifici per fase del ciclo cellulare.
• L'applicazione ELISA permette la rilevazione dei livelli di CDK2 fosforilato; ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevazione in base al formato del vostro saggio.
• L'anticorpo ha reazione crociata con CDK2 di uomo e topo; per altre specie, verificare l'omologia della sequenza nella regione intorno a Tyr15 prima dell'uso.

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