Phospho-CDKN1B/p27KIP1-T187 Rabbit pAb per WB - P46527

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CDKN1B/p27KIP1

• CDKN1B codifica l'inibitore della chinasi dipendente dalla ciclina 1B, noto anche come p27Kip1, un regolatore critico della progressione del ciclo cellulare.
• Inibisce l'attività chinasica del CDK2 legato alla ciclina A, mostrando poco effetto sui complessi CDK2-SPDYA, e blocca potentemente l'attività della ciclina E- e ciclina A-CDK2, promuovendo l'arresto in G1. Riferimenti correlati: PMID:28666995
• p27Kip1 forma complessi con ciclina D-CDK4 e modula l'assemblaggio e l'attivazione del complesso CCND1-CDK4, agendo come inibitore o attivatore a seconda dello stato di fosforilazione.
• A livello subcellulare, p27 risiede principalmente nel nucleo ma può localizzarsi anche nel citoplasma e negli endosomi; la sua localizzazione influenza le sue funzioni regolatorie.
• L'espressione tissutale è ampia, con proteina rilevata in tutti i tessuti testati; l'espressione più alta è osservata nel muscolo scheletrico, mentre livelli inferiori si trovano nel fegato e nel rene. Riferimenti correlati: PMID:15509543, PMID:8033212
• Il peso molecolare previsto è di circa 22 kDa.
• p27 è classificata come una fosfoproteina con attività di inibitore della proteina chinasi e soppressore tumorale, e subisce coniugazione ubiquitina, riflettendo la sua stretta regolazione post-traduzionale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Dato che questo anticorpo è generato contro un peptide fosfo-specifico circostante T187, è probabile che rilevi CDKN1B/p27KIP1 specificamente quando fosforilata a questo residuo. Validare la specificità della fosforilazione utilizzando campioni trattati con fosfatasi o mutanti non fosforilabili.
• Per Western blot (WB), considerare l'utilizzo di lisati cellulari o tissutali freschi preparati con inibitori delle fosfatasi per preservare il segnale di fosforilazione; è prevista una banda vicino a 22 kDa.
• Data l'espressione tissutale ubiquitaria, diverse linee cellulari umane o tipi di tessuti possono fungere da controlli positivi; tuttavia, l'intensità del segnale può variare con lo stato del ciclo cellulare.
• La natura policlonale del coniglio dell'anticorpo può fornire una rilevazione robusta in varie condizioni denaturanti e riducenti; ottimizzare sperimentalmente le condizioni di blocco e diluizione.

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