Anticorpo policlonale coniglio Phospho-CGAS (S420) per WB e ELISA - Q8C6L5

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CGAS

• CGAS (cyclic GMP-AMP synthase) è una nucleotidiltransferasi che catalizza la formazione di 2',3'-cGAMP da ATP e GTP, un secondo messaggero fondamentale per l'immunità innata. Riferimenti correlati: PMID:23258413 PMID:23647843 PMID:23722158

• Agisce come sensore chiave del DNA citosolico: lega direttamente il DNA a doppio filamento per indurre gocce di tipo liquido che attivano CGAS, portando alla produzione di interferone di tipo I dipendente da STING1. Riferimenti correlati: PMID:23722158 PMID:28095500 PMID:28314590

• Lega preferenzialmente dsDNA lunghi (circa 45 bp) e forma reti a scala che stabilizzano in modo cooperativo i complessi cGAS-dsDNA. Riferimenti correlati: PMID:28902841

• Rileva DNA estraneo da virus, retrovirus e batteri, e rileva anche il DNA endogeno proprio perso durante lo stress cellulare (ad esempio stress mitocondriale, senescenza, formazione di micronuclei). Riferimenti correlati: PMID:23258413 PMID:23647843 PMID:23722158 PMID:23929945 PMID:28738408 PMID:28759028

• Il 2',3'-cGAMP può trasferirsi alle cellule vicine tramite giunzioni comunicanti o particelle virali, propagando l'immunità antivirale. Riferimenti correlati: PMID:24077100 PMID:26229117 PMID:31992625

• Nelle cellule sane, CGAS nucleare è mantenuto inattivo dal legame con la cromatina, prevenendo l'autoimmunità; tuttavia, sopprime anche la riparazione del DNA interagendo con PARP1. Riferimenti correlati: PMID:30356214 PMID:31544964 PMID:31808743 PMID:32911480 PMID:32911481 PMID:35210392

• La localizzazione subcellulare include nucleo, cromosomi, citoplasma, citosol e membrana cellulare. La proteina è soggetta a molteplici modifiche post-traduzionali come fosforilazione, acetilazione e palmitoilazione, che regolano la sua attività e localizzazione.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato intorno alla serina 420 di CGAS di topo. Questo progetto garantisce la specificità per la forma fosforilata. Si consiglia di utilizzare il trattamento con fosfatasi sui campioni per confermare la fosfo-specificità nel Western blot.
• Per Western blot (WB), è prevista una banda intorno a 58 kDa in base al peso molecolare previsto. Convalidare la diluizione dell'anticorpo e i tempi di esposizione nel proprio sistema di campioni.
• Per ELISA, abbinare a un anticorpo di rilevamento appropriato e ottimizzare l'antigene di rivestimento e le concentrazioni di anticorpo. Testare la reattività incrociata con CGAS di uomo e ratto per confermare la reattività.
• Eseguire controlli appropriati (cellule non stimolate vs cellule stimolate, lisati trattati con fosfatasi) per assicurarsi che il segnale rilevato sia dipendente dalla fosforilazione.

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