pAb di coniglio Phospho-Chk2-S516 - O96017

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della serina/treonina-protein chinasi Chk2

• Serina/treonina-protein chinasi che media la risposta al danno del DNA fosforilando effettori a valle sulla sequenza consenso [L-X-R-X-X-S/T], regolando l'arresto del ciclo cellulare, la riparazione del DNA e l'apoptosi (PubMed:37943659).
  Riferimenti correlati: PMID:37943659
• Controlla i checkpoint del ciclo cellulare fosforilando le fosfatasi CDC25A, CDC25B e CDC25C, inibendone l'attività e bloccando la progressione del ciclo cellulare. Fosforila inoltre NEK6 per imporre l'arresto in fase G2/M.
• Promuove la riparazione del DNA tramite fosforilazione di BRCA2, migliorando il reclutamento di RAD51 per la ricombinazione omologa, e attiva FOXM1 per stimolare la trascrizione dei geni di riparazione.
• Regola l'apoptosi fosforilando p53 alla Serina-20 per alleviare l'inibizione di MDM2, portando alla stabilizzazione di p53; fosforila inoltre MDM4 e PML per promuovere ulteriormente la segnalazione apoptotica.
• Presenta funzioni di soppressore tumorale: mantiene la stabilità cromosomica tramite fosforilazione di BRCA1 per l'assemblaggio del fuso mitotico ed è coinvolto nell'inibizione di SIRT1 mediata da CCAR2 (PubMed:25361978).
  Riferimenti correlati: PMID:25361978
• In condizioni di stress ossidativo, promuove l'autofagia fosforilando TRIM32 alla Serina-55, portando all'ubiquitinazione di ATG7 e all'aumento dell'assemblaggio degli autofagosomi (PubMed:37943659).
  Riferimenti correlati: PMID:37943659
• È inoltre implicato nelle interazioni ospite-virus: fosforila la proteina ICP0 dell'herpes simplex virus, attivando la sua attività di ubiquitina ligasi mirata a SUMO.
• Si localizza prevalentemente nel nucleo (inclusi i corpi PML e il nucleoplasma) ed è altamente espresso in testicolo, milza, colon e leucociti del sangue periferico.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per preservare il segnale di fosforilazione nel western blot, aggiungere inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione e considerare l'induzione del danno del DNA (ad esempio tramite radiazioni ionizzanti o farmaci chemioterapici) per aumentare la fosforilazione della Ser516.
• Per applicazioni ELISA, convalidare l'anticorpo con standard di peptide fosforilato e controlli appropriati; può essere utilizzato sia come reagente di cattura che di rilevazione.
• È stata riportata reattività crociata con Chk2 di topo e ratto; convalidare la reattività nel vostro sistema sperimentale specifico utilizzando lisati di tessuti o estratti di linee cellulari appropriati.
• Titrare empiricamente la concentrazione dell'anticorpo per ottenere rapporti segnale/rumore ottimali nella vostra configurazione di analisi.

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