Anticorpo monoclonale di coniglio Phospho-CREB1-S133 per WB, IHC-P, FC (intra), ELISA - P16220

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CREB1

• La proteina 1 legante l'elemento responsivo all'AMP ciclico (CREB1) è un fattore di trascrizione dipendente dalla fosforilazione che si lega all'elemento di risposta al cAMP (CRE) nel DNA.
• CREB1 stimola la trascrizione dopo il legame con il CRE, una sequenza presente in molti promotori virali e cellulari; l'attivazione è potenziata dai coattivatori TORC che agiscono indipendentemente dalla fosforilazione di Ser-119. Riferimenti correlati: PMID:14536081
• È coinvolta in diversi processi cellulari, inclusa la sincronizzazione della ritmicità circadiana e la differenziazione delle cellule adipose.
• Nei cardiomiociti, CREB1 regola l'espressione di fattori della risposta apoptotica e infiammatoria in risposta alla segnalazione AKT mediata da ERFE.
• La proteina si localizza esclusivamente nel nucleo, in linea con il suo ruolo di fattore di trascrizione.
• CREB1 è una fosfoproteina soggetta a splicing alternativo ed è stata identificata in riarrangiamenti cromosomici, evidenziandone la complessità regolatoria e la rilevanza nelle malattie.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• Questo anticorpo rileva un sito di fosforilazione; per preservare il segnale, considerare l'aggiunta di inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione.
• Per il Western blot, eseguire blot paralleli con un anticorpo pan-CREB per distinguere i cambiamenti nella fosforilazione dai livelli di proteina totale.
• Nell'IHC-P, alcuni metodi di recupero dell'antigene possono defosforilare l'epitopo; ottimizzare le condizioni di recupero (ad esempio, calore più blando o recupero enzimatico) per mantenere la reattività.
• Durante la citometria a flusso intracellulare, utilizzare protocolli di fissazione e permeabilizzazione progettati per conservare gli epitopi fosforilati e includere controlli isotipo appropriati.
• I formati ELISA dovrebbero essere validati nella matrice biologica rilevante; considerare l'uso di un approccio di cattura o rilevamento fosfo-specifico per una sensibilità ottimale.

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