Anticorpo policlonale di coniglio anti-Fosfo-Ciclina E1-T395 per WB, IF/ICC, ELISA - P24864

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione della Ciclina E1

• La Ciclina E1 è una ciclina specifica per la fase G1/S, essenziale per il controllo del ciclo cellulare alla transizione G1/S. Si complessa con la chinasi ciclina-dipendente 2 (CDK2) e la attiva, guidando la progressione dalla fase G1 alla fase S.
• Appartiene alla famiglia delle cicline, un gruppo di proteine regolatrici la cui concentrazione oscilla durante il ciclo cellulare e che governano i checkpoint chiave.
• La proteina si localizza prevalentemente nel nucleo, coerentemente con il suo ruolo nella regolazione della trascrizione e del macchinario del ciclo cellulare.
• L'espressione tissutale è massima nei testicoli e nella placenta, con livelli bassi nelle cellule epiteliali bronchiali, riflettendo la sua funzione nei tessuti in proliferazione.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione in molteplici residui (come T395), l'ubiquitinazione e la potenziale sumoilazione, che modulano la stabilità e l'attività della proteina.
• Lo splicing alternativo genera isoforme con una regolazione distinta e potenzialmente funzioni tessuto-specifiche.
• Il peso molecolare calcolato è di circa 47.077 Da (UniProt), coerente con la banda di circa 47 kDa osservata nel western blotting.
• Le annotazioni UniProt evidenziano il coinvolgimento nella divisione cellulare, nella regolazione delle chinasi ciclina-dipendenti e nell'identificazione proteomica, sottolineando la sua importanza nella proliferazione cellulare normale e cancerosa.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un fosfo-peptide sintetico che circonda il residuo T395, rendendo questo anticorpo ideale per rilevare specificamente la Ciclina E1 fosforilata in questo sito. Per confermare la fosfo-specificità, si consideri il trattamento dei campioni con λ-fosfatasi o l'uso di un blocco con peptide non fosforilato.
• Nel western blotting, è attesa una banda intorno ai 47 kDa; tuttavia, convalidare il peso molecolare nel proprio sistema di campioni specifico, poiché le modifiche post-traduzionali possono alterare la migrazione.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica, prevedere una colorazione nucleare. Includere DAPI o un altro controcolorante nucleare per verificare la localizzazione e utilizzare condizioni di fissazione/permeabilizzazione appropriate per preservare gli fosfo-epitopi.
• Quando applicato in ELISA, l'anticorpo può catturare o rilevare la Fosfo-Ciclina E1 nei lisati; ottimizzare i passaggi di rivestimento e rilevamento per il proprio formato di saggio.
• La reattività crociata è riportata per uomo, topo e ratto; se si utilizzano altre specie, eseguire l'allineamento di sequenza attorno al residuo T395 e una convalida preliminare.

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