PAb coniglio Phospho-EGFR-Y1045 per WB, ELISA - P00533

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di EGFR

• Il recettore del fattore di crescita epidermico (EGFR) è una tirosin-chinasi recettoriale che lega i ligandi della famiglia EGF, tra cui EGF, TGF-alfa, AREG, BTC, EREG e HBEGF, per innescare la segnalazione a valle. Riferimenti correlati: PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• Il legame del ligando induce l'omo- e/o eterodimerizzazione del recettore e l'autofosforilazione su residui chiave di tirosina citoplasmatici, come Y1045, creando siti di docking per proteine adattatrici come GRB2 e attivando cascate tra cui RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC e STAT. Riferimenti correlati: PMID:27153536
• EGFR fosforila direttamente substrati come RGS16 e MUC1 e regola la migrazione cellulare, l'apprendimento, la memoria e la segnalazione del dolore. Riferimenti correlati: PMID:11602604, PMID:11483589, PMID:20462955
• L'isoforma 2 può agire come antagonista dell'azione di EGF ed è espressa in modo notevole nei carcinomi ovarici.
• La localizzazione subcellulare include la membrana plasmatica, gli endosomi, l'apparato di Golgi, il reticolo endoplasmatico, il nucleo e le forme secrete.
• Le modificazioni post-traduzionali comprendono fosforilazione, glicosilazione, ubiquitinazione e palmitoilazione, come evidenziato da parole chiave come Fosfoproteina, Glicoproteina e Lipoproteina.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato corrispondente alla regione Y1045; utilizzare inibitori della fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare la fosforilazione.
• Per Western blot, si consiglia di caricare lisati cellulari stimolati con EGF e non stimolati come controlli positivo e negativo, e titolare l'anticorpo per ottenere un segnale ottimale.
• È possibile eseguire ELISA diretto; valutare le condizioni di rivestimento e rilevamento in modo empirico per il vostro formato di saggio specifico.
• La reattività crociata è stata dimostrata con l'EGFR umano; per altre specie, effettuare una validazione a causa di potenziali differenze di sequenza.
• Confermare la specificità tramite competizione peptidica o trattamento con fosfatasi nei campioni biologici pertinenti.

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