Anticorpo policlonale coniglio anti-Fosfo-EGFR-Y1068 per WB, IP, ELISA - P00533

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'EGFR

• EGFR (ErbB-1/HER1) è un membro della famiglia dei recettori tirosin chinasi ErbB che media la proliferazione cellulare, la sopravvivenza e la differenziazione dopo il legame del ligando.
• La dimerizzazione del recettore indotta dal ligando innesca l'autofosforilazione sui residui tirosina citoplasmatica, inclusa Y1068, creando siti di ancoraggio per proteine adattatrici come GRB2, che attivano cascate a valle tra cui RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC e moduli STAT. Riferimenti correlati: PMID:27153536
• EGFR segnala anche tramite la via NF-kappa-B e fosforila direttamente RGS16 e MUC1, modulando l'attività GTPasi e l'adesione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:11116146, PMID:11602604, PMID:11483589
• L'isoforma 2 può agire come antagonista dell'azione dell'EGF.
• La localizzazione subcellulare include la membrana plasmatica, gli endosomi, il reticolo endoplasmatico, l'apparato di Golgi e il nucleo, con una forma secreta riportata anch'essa.
• EGFR è espresso ubiquitariamente, con l'isoforma 2 rinvenuta in modo notevole nei tumori ovarici.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, glicosilazione, metilazione, idrossilazione, palmitoilazione e ubiquitinazione, tipiche di un recettore di membrana altamente regolato.
• Oltre alla fisiologia normale, EGFR funge da recettore della cellula ospite per l'ingresso del virus dell'epatite C (HCV).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il western blotting (WB), utilizzare cocktail di inibitori delle fosfatasi durante la lisi cellulare per preservare la fosforilazione. È prevista una banda specifica vicino a 134 kDa. Confermare la specificità pre-incubando l'anticorpo con il peptide immunogeno fosforilato o trattando i lisati con fosfatasi lambda.
• Per l'immunoprecipitazione (IP) e l'ELISA, convalidare la fosfo-specificità utilizzando controlli appropriati; il blocco con peptide non fosforilato o il trattamento con fosfatasi possono aiutare a differenziare i segnali.
• La reattività crociata con il topo garantisce l'applicabilità nei modelli murini; convalidare nel sistema di campione pertinente prima dell'uso estensivo.

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