Phospho-EGFR-Y1086 Coniglio pAb per WB, ELISA - P00533

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di EGFR

• EGFR (Recettore del Fattore di Crescita Epidermico), anche designato ErbB-1 o HER1, è un membro della famiglia ErbB di recettori tirosin-chinasici. È ampiamente espresso in tessuti epiteliali e altri. Un isoforma alternativa (isoforma 2) può funzionare come antagonista dell'azione dell'EGF.
• EGFR lega multipli ligandi della famiglia EGF, inclusi EGF, TGF-α, anfiregulina ed epigen, portando alla dimerizzazione del recettore e all'autofosforilazione sui residui tirosinici citoplasmatici. Riferimenti correlati: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960, PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• Dopo l'attivazione, EGFR recluta proteine adattatrici e stimola le principali cascate di segnalazione come le vie RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC e STAT, governando proliferazione, sopravvivenza e differenziazione. Riferimenti correlati: PMID:27153536
• EGFR attiva inoltre la segnalazione di NF-kappa-B e può fosforilare direttamente proteine substrato tra cui RGS16 (modulatore di segnalazione G-proteica), MUC1 (adesione cellulare/Wnt) e CCDC88A/GIV (promotore di migrazione), collegando la sua attività a processi cellulari diversi. Riferimenti correlati: PMID:11116146, PMID:11602604, PMID:11483589, PMID:20462955
• A livello subcellulare, EGFR si trova principalmente alla membrana cellulare ma è anche rilevato nel reticolo endoplasmatico, Golgi, nucleo, endosomi e può essere secreto.
• Espresso ubiquitariamente nei tessuti umani; l'isoforma 2 è espressa in modo significativo nei tumori ovarici.
• (Infezione microbica) EGFR funge da recettore della cellula ospite per l'ingresso del virus dell'epatite C (HCV) negli epatociti facilitando la formazione del complesso recettoriale CD81-CLDN1.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno di questo anticorpo è un fosfopeptide sintetico che circonda Y1086 dell'EGFR umano, progettato per riconoscere specificamente la forma fosforilata.
• Per il Western blot, preparare lisati da linee cellulari umane EGFR-positive (es. A431 o HeLa) con e senza stimolazione con EGF; una banda a ~134 kDa conferma il rilevamento.
• Per l'ELISA, utilizzare l'anticorpo per catturare o rilevare fosfo-EGFR in lisati di cellule umane o estratti tissutali; ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevamento in base alla piattaforma di saggio.
• Assicurarsi che cocktail di inibitori delle fosfatasi siano inclusi durante la lisi e la manipolazione del campione per preservare il segnale di fosforilazione.
• Poiché la reattività incrociata è limitata all'EGFR umano, convalidare l'anticorpo nei vostri sistemi di campioni umani.

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