Anticorpo policlonale di coniglio Phospho-EGFR (Y1148) per WB, ELISA - P00533

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'EGFR

• L'EGFR è un recettore tirosin chinasi che si lega ai ligandi della famiglia EGF (EGF, TGF-alfa, AREG, epigenina, betacellulina, epiregulina, HB-EGF) e innesca la dimerizzazione del recettore e l'autofosforilazione su residui tirosina chiave, inclusi Y1148. Riferimenti correlati: PMID:10805725, PMID:27153536
• L'EGFR autofosforilato funge da sito di ancoraggio per proteine adattatrici come GRB2, attivando cascate di segnalazione a valle: RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC e moduli STAT. Attiva anche NF-kappa-B e fosforila direttamente RGS16 e MUC1, collegandosi alle vie delle proteine G e della beta-catenina. Riferimenti correlati: PMID:27153536, PMID:11116146, PMID:11602604, PMID:11483589
• L'EGFR regola positivamente la migrazione cellulare attraverso l'interazione con CCDC88A/GIV e contribuisce all'apprendimento, alla memoria e alla segnalazione del dolore. Riferimenti correlati: PMID:20462955
• L'isoforma 2 può agire come antagonista dell'azione dell'EGF ed è espressa anche nei tumori ovarici; in generale, l'EGFR è espresso ubiquitariamente.
• A livello subcellulare, l'EGFR risiede nella membrana cellulare, nel RE, nel Golgi, nel nucleo, negli endosomi ed è secreto.
• Nelle infezioni virali, l'EGFR agisce come recettore per il virus dell'epatite C (HCV), mediando l'ingresso promuovendo la formazione del complesso CD81-CLDN1.
• Parole chiave: recettore, tirosina-proteina chinasi, proto-oncogene, fosfoproteina, glicoproteina; critica per la trasduzione del segnale e spesso disregolata nel cancro.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, utilizzare un marcatore di peso molecolare appropriato per 134 kDa e includere lisati di controllo positivi da linee cellulari umane stimolate con EGF per confermare la specificità fosfo.
• Verificare la dipendenza dalla fosforilazione trattando i campioni con lambda fosfatasi prima dell'immunoblotting; la perdita di segnale conferma il legame specifico fosfo.
• Per l'ELISA, considerare il rivestimento con peptide fosfo e controlli peptide non-fosfo per valutare la reattività incrociata; ottimizzare la diluizione dell'anticorpo e le condizioni di rilevamento.
• Dato che questo anticorpo è policlonale di coniglio, si consiglia un anticorpo secondario anti-coniglio coniugato con HRP; utilizzare il blocco con BSA per minimizzare il legame non specifico.

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