Anticorpo Policlonale di Coniglio Fosfo-EGFR-Y1197 per WB - P00533

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del Recettore del Fattore di Crescita Epidermico (EGFR)

• EGFR è una tirosin-chinasi recettoriale che lega ligandi della famiglia EGF e attiva molteplici cascate di segnalazione, regolando crescita, sopravvivenza e differenziazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960
• La dimerizzazione indotta dal ligando porta all'autofosforilazione su tirosine chiave; la fosforilazione in Y1197 crea un sito di ancoraggio per GRB2. Riferimenti correlati: PMID:27153536
• L'EGFR attivato innesca almeno quattro principali vie di segnalazione: RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC e STATs. Riferimenti correlati: PMID:27153536
• L'EGFR fosforila direttamente substrati come RGS16 e MUC1, modulando la segnalazione delle proteine G e l'adesione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:11602604 PMID:11483589
• L'interazione con CCDC88A/GIV promuove una ritenzione prolungata sulla membrana e la migrazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:20462955
• Una isoforma alternativa (isoforma 2) può agire come antagonista della segnalazione di EGF.
• L'EGFR è prevalentemente localizzato sulla membrana plasmatica, ma viene anche trasportato negli endosomi, nell'apparato di Golgi, nel reticolo endoplasmatico e nel nucleo; esiste anche una forma secreta. È espresso ubiquitariamente, con l'isoforma 2 presente anche nei tumori ovarici.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blotting, utilizzare cocktail di inibitori delle fosfatasi durante la lisi cellulare per preservare la fosforilazione in Y1197.
• Convalidare la specificità dell'anticorpo confrontando lisati cellulari non trattati versus stimolati con EGF; ci si aspetta un aumento sostanziale dell'intensità della banda intorno a 134 kDa dopo attivazione.
• La proteina EGFR matura ha un peso molecolare previsto di ~134 kDa, ma modificazioni post-traduzionali come la glicosilazione possono causare uno shift di mobilità; utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e controlli positivi.
• Come punto di partenza generale per anticorpi policlonali fosfo-specifici, considerare di testare diluizioni comprese tra 1:500 e 1:2000; ottimizzare per le vostre specifiche condizioni sperimentali.

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