Anticorpo policlonale coniglio Phospho-eIF2α-S49 per WB, IHC-P - P05198

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di eIF2α (EIF2S1)

• EIF2S1 codifica per la subunità alfa del fattore di inizio della traduzione eucariotica 2 (eIF2), un eterotrimero che trasporta il Met-tRNAi iniziatore alla subunità ribosomiale 40S. Riferimenti bibliografici: PMID:16289705
• eIF2, insieme a GTP e Met-tRNAi, forma un complesso ternario che si lega alla subunità 40S per generare il complesso di pre-iniziazione 43S; il successivo reclutamento dell'mRNA porta alla formazione del complesso 80S dopo l'idrolisi del GTP. Riferimenti bibliografici: PMID:16289705
• Per riattivare eIF2, la GDP deve essere scambiata con GTP dal fattore di scambio di nucleotidi guanici eIF2B. Riferimenti bibliografici: PMID:16289705
• La fosforilazione alla Serina49 (e ad altri residui di serina) da parte delle chinasi che rilevano lo stress (EIF2AK1/HRI, EIF2AK2/PKR, EIF2AK3/PERK, EIF2AK4/GCN2) converte eIF2α in un inibitore globale della traduzione, attenuando la sintesi proteica dipendente dalla capolina e favorendo contemporaneamente la traduzione di mRNA responsivi allo stress come ATF4 e QRICH1. Riferimenti bibliografici: PMID:19131336 PMID:33384352 PMID:38340717
• eIF2α partecipa anche alla mitofagia: in seguito al danno mitocondriale, la forma fosforilata di eIF2α si rilocalizza sulla superficie mitocondriale per promuovere la mitofagia indipendente da PRKN. Riferimenti bibliografici: PMID:38340717
• La localizzazione subcellulare include citoplasma, citosol, granuli di stress e mitocondri.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione estesa; eIF2α lega l'RNA ed è classificato come fattore di inizio, fosfoproteina e membro del proteoma di riferimento.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosfospecifico corrispondente ai residui intorno alla Serina49 dell'EIF2S1 umano. Per preservare la fosforilazione, aggiungi inibitori delle fosfatasi ai tamponi di lisi e lavora rapidamente.
• Per Western blot è attesa una banda a circa 36 kDa. Conferma la specificità trattando i campioni con λ-fosfatasi o utilizzando in parallelo anticorpi anti-eIF2α non fosforilato.
• La reattività crociata riportata con topo e ratto permette studi su più specie; convalida sempre nel sistema di campioni pertinente.
• Per IHC-P, ottimizza il recupero dell'antigene (ad esempio, tampone citrato, pH 6.0) e la diluizione dell'anticorpo primario. Includi tessuti di controllo positivo e negativo.

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