Anticorpo Monoclonale Coniglio Phospho-eIF4EBP1 (S65) per WB, ELISA - Q13541

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'eIF4EBP1

• eIF4EBP1 (fattore di inizio della traduzione eucariotica 4E-binding protein 1), noto anche come PHAS-I, funge da principale repressore dell'inizio della traduzione dipendente dalla struttura 5' cap legandosi al fattore di inizio eucariotico 4E (eIF4E).
• Nel suo stato ipofosforilato, l'eIF4EBP1 compete con l'eIF4G (eIF4G1 ed eIF4G3) per il legame con l'eIF4E, impedendo così l'assemblaggio del complesso eIF4F e inibendo l'inizio della traduzione.
• L'iperfosforilazione dell'eIF4EBP1, spesso mediata dalla via mTORC1, induce la sua dissociazione dall'eIF4E, permettendo la formazione del complesso eIF4F e l'attivazione della traduzione.
• L'eIF4EBP1 integra segnali da ormoni, fattori di crescita e nutrienti tramite le vie di segnalazione MAP chinasi e mTOR per controllare la sintesi proteica e la crescita cellulare.
• È una fosfoproteina con molteplici siti di fosforilazione, inclusa la Ser65, che modulano la sua affinità per l'eIF4E e la sua capacità di regolare la traduzione.
• A livello subcellulare, l'eIF4EBP1 si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo, in linea con i suoi ruoli nel controllo della traduzione e possibilmente nello shuttling nucleo-citoplasmatico.
• La proteina è modificata post-traduzionalmente tramite acetilazione e coniugazione ubiquitina-like (Ubl) oltre alla fosforilazione, evidenziando complessi meccanismi regolatori.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Poiché questo anticorpo mira a un sito di fosforilazione specifico (Ser65), confermare la specificità del rilevamento trattando i lisati cellulari con lambda fosfatasi o confrontando i segnali da tipi selvatici rispetto a mutanti carenti di fosforilazione.
• Per il Western blot, utilizzare procedure standard ma assicurarsi che i tamponi di lisi contengano inibitori delle fosfatasi per preservare gli stati di fosforilazione. Un agente di blocco come la BSA può aiutare a ridurre il legame aspecifico tipico degli anticorpi fosfo-specifici.
• Nell'ELISA, considerare il rivestimento con l'immunogeno peptidico come controllo positivo e includere un peptide non fosforilato per verificare la fosfo-specificità.
• L'attivazione di mTORC1 (es. tramite insulina o stimolazione con siero) aumenta la fosforilazione Ser65, mentre l'inibizione (es. rapamicina) la diminuisce; includere appropriati controlli stimolatori o inibitori nei vostri esperimenti.

CamelBio: Il Vostro Ponte di Approvvigionamento Completo

CamelBio fornisce ai produttori di diagnostica e ai team di ricerca una selezione completa di materie prime IVD, incluse coppie di anticorpi convalidate, anticorpi monoclonali e policlonali ottimizzati e reagenti ausiliari in bulk. Per progetti mirati a eIF4EBP1 e alla regolazione della traduzione, offriamo strumenti di rilevamento fosfo-specifici e possiamo reperire materie prime rare o personalizzate per soddisfare le vostre esigenze di sviluppo. Collaborate con noi per colmare il divario dal concetto alla clinica con reagenti affidabili e di alta qualità.