Phospho-eIF4EBP1-T45 Rabbit pAb per Western Blot - Q13541

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di eIF4EBP1

• Il fattore di inizio della traduzione eucariotica 4E-binding protein 1 (eIF4EBP1, noto anche come PHAS-I) è un key repressore dell'inizio della traduzione dipendente dal cappuccio. Appartiene alla famiglia delle proteine leganti eIF4E e compete con eIF4G per il legame con eIF4E, impedendo così l'assemblaggio del complesso eIF4F.
• L'attività repressiva di eIF4EBP1 è regolata dal suo stato di fosforilazione: eIF4EBP1 ipofosforilato si lega fortemente a eIF4E e inibisce la traduzione, mentre l'iperfosforilazione (es. a Thr45 e altri siti) lo dissocia da eIF4E, permettendo la formazione di eIF4F e l'inizio della traduzione.
• eIF4EBP1 media la regolazione della sintesi proteica a valle di vari stimoli, inclusi ormoni, fattori di crescita e nutrienti, attraverso le vie di segnalazione MAP chinasi e mTORC1. La fosforilazione a Thr45 è un evento critico precoce nella cascata sequenziale di fosforilazione multi-sito.
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente citoplasmatica, ma eIF4EBP1 può anche translocare nel nucleo, dove potrebbe avere ruoli regolatori aggiuntivi.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, ubiquitinazione (formazione del legame isopeptidico) ed estesa fosforilazione a più residui. Il peso molecolare calcolato della proteina non modificata è di circa 12,5 kDa, con una migrazione su SDS-PAGE spesso osservata intorno a 13–15 kDa a seconda dello stato di fosforilazione.
• eIF4EBP1 è ampiamente espresso e gioca un ruolo centrale nel controllo della crescita cellulare, della proliferazione e della sopravvivenza. La disregolazione della sua fosforilazione è implicata nel cancro e nei disturbi metabolici.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• L'immunogeno utilizzato è un peptide fosfo-sintetico che copre Thr45, indicando che questo anticorpo è progettato per riconoscere specificamente la forma fosforilata Thr45 di eIF4EBP1. La reattività crociata con eIF4EBP1 non fosforilato o altri membri della famiglia è improbabile ma dovrebbe essere valutata nei sistemi modello pertinenti.
• Per il Western blot, assicurarsi che i lisati proteici siano preparati in presenza di inibitori delle fosfatasi per preservare lo stato di fosforilazione. È prevista una banda a circa 13–15 kDa per eIF4EBP1 umano; il peso molecolare apparente può spostarsi leggermente a seconda dei livelli complessivi di fosforilazione.
• Includere controlli appropriati per validare la specificità dell'anticorpo, come lisati non trattati rispetto a lisati trattati con fosfatasi, o lisati da cellule con attività mTORC1 modulata (es. privazione di siero/stimolazione con insulina).
• Le prestazioni dell'anticorpo in altre applicazioni (es. IHC, IF, IP) non sono state descritte; è raccomandato un test preliminare se utilizzato al di fuori del WB.

CamelBio: Il Tuo Ponte di Approvvigionamento Tutto-in-Uno

CamelBio si specializza nel fornire produttori di diagnostica e istituti di ricerca con un portafoglio completo di materie prime IVD. Questo anticorpo anti-phospho-eIF4EBP1 supporta la ricerca sul controllo traduzionale e sulla segnalazione mTOR, aree critiche per la diagnostica oncologica e delle malattie metaboliche. Come partner integrato per l'approvvigionamento, CamelBio offre coppie di anticorpi convalidati, anticorpi monoclonali/policlonali ottimizzati, reagenti ausiliari in bulk e accesso flessibile a materie prime per target rari—semplificando il flusso di lavoro dal concetto alla clinica.