Fosfo-eNOS-S1177 coniglio pAb per WB, ELISA - P29474

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della eNOS

• La sintasi dell'ossido nitrico 3 (eNOS) è un enzima specifico endoteliale che catalizza la produzione di ossido nitrico (NO), una molecola chiave di segnalazione nel sistema cardiovascolare.
• Il NO derivato dalla eNOS induce il rilassamento della muscolatura liscia vascolare attraverso una via di trasduzione segnale mediata da cGMP, svolgendo un ruolo critico nella regolazione della pressione sanguigna. Riferimenti correlati: PMID:1378832
• Il NO generato dalla eNOS media anche l'angiogenesi indotta da VEGF nei vasi coronarici e promuove l'attivazione piastrinica, contribuendo all'emostasi.
• Una isoforma di eNOS generata per splicing alternativo lacks attività catalitica e può agire come regolatore dominante-negativo formando eterodimeri con l'enzima attivo a lunghezza intera.
• La eNOS localizza alla membrana cellulare, alle caveole, al citoplasma, al citoscheletro e all'apparato di Golgi; il targeting alla membrana è facilitato dalla miristoilazione e palmitoilazione N-terminale.
• L'espressione è stata rilevata nelle piastrine, nella placenta, nel fegato e nel rene.
• La eNOS è una fosfoproteina la cui attività è modulata dalla fosforilazione, dal legame calcio/calmodulina e da cofattori come FAD, FMN, eme, ferro, zinco e NADP.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Quando si esegue un Western blot, includere inibitori delle fosfatasi nel tampone di lisi per preservare i segnali di fosforilazione e ottimizzare le condizioni di bloccaggio e lavaggio per gli anticorpi specifici per la fosforilazione.
• Per il rilevamento della fosforilazione della eNOS a Ser1177, può essere impiegata la stimolazione delle cellule endoteliali con VEGF o l'esposizione a stress di taglio; tuttavia, la risposta dovrebbe essere validata nel sistema di campione pertinente.
• Nell'ELISA, assicurarsi che l'antigene di rivestimento o l'anticorpo di cattura siano selezionati in modo appropriato ed eseguire una titolazione per determinare le concentrazioni di lavoro ottimali.
• Dato che la eNOS condivide omologia con altre isoforme NOS, la reattività crociata dovrebbe essere valutata se utilizzata in sistemi con espressione di isoforme miste.

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