Anticorpo policlonale di coniglio Phospho-EPHA2-Y594 per WB ed ELISA - P29317

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di EPHA2

• EPHA2 codifica per il recettore 2 di tipo efrina-A, un recettore tirosin-chinasico che trasduce segnali legandosi a ligandi efrina-A legati alla membrana su cellule adiacenti, avviando una segnalazione bidirezionale (in avanti attraverso il recettore e inversa attraverso il ligando).
• Regola una varietà di processi cellulari tra cui migrazione cellulare, adesione mediata da integrine, proliferazione e differenziazione, in parte attraverso la modulazione della via di segnalazione ERK1/ERK2.
• EPHA2 partecipa a processi di sviluppo come angiogenesi, patterning del rombencefalo e morfogenesi ramificata nella ghiandola mammaria, e contribuisce all'organizzazione e trasparenza delle cellule fibrose del cristallino.
• Oltre alla normale fisiologia, EPHA2 agisce come recettore per il virus dell'epatite C (HCV) e il citomegalovirus umano (HCMV), mediando l'ingresso virale nelle cellule ospiti.
• La proteina è localizzata alla membrana cellulare con arricchimento in protrusioni cellulari dinamiche, inclusi membrane a ruffles, lamellipodi e adesioni focali, in linea con i suoi ruoli nell'adesione e motilità cellulare.
• EPHA2 è altamente espresso in tessuti ricchi di epitelio come pelle, intestino, polmone e ovaio, ed è anche rilevato in linee cellulari cerebrali e di glioma.
• Le caratteristiche strutturali chiave includono un dominio extracellulare legante l'efrina, un dominio transmembrana a passaggio singolo e un dominio chinasico intracellulare con il residuo di tirosina fosforilabile Y594.
• EPHA2 è classificato sotto molteplici parole chiave funzionali: tirosina-proteina chinasi, legante ATP, recettore, glicoproteina, splicing alternativo e angiogenesi, sottolineando il suo ruolo centrale nella trasduzione del segnale e nella malattia.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico che comprende Y594, che dovrebbe fornire alta specificità per la forma fosforilata—confermare la specificità trattando i campioni con λ-fosfatasi prima del western blot.
• Per il western blotting, includere inibitori della fosfatasi durante la lisi e considerare l'uso di controlli positivi come cellule stimolate con efrina-A1 o linee cellulari di cancro epiteliale note per sovraesprimere EPHA2.
• A causa della reattività incrociata riportata con il ratto, questo anticorpo può essere adatto per studi su modelli di ratto; tuttavia, convalidare la reattività e la diluizione ottimale nel vostro specifico sistema campione.
• In ELISA, utilizzare un formato diretto o indiretto con antigene di cattura phospho-EPHA2; le condizioni del saggio dovrebbero essere ottimizzate empiricamente per la concentrazione di rivestimento e la diluizione dell'anticorpo di rilevamento.
• Notare che il peso molecolare previsto di EPHA2 è di circa 108 kDa—eseguire sempre marcatori di peso molecolare appropriati e verificare la dimensione della banda.

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