pAb di coniglio anti-Phospho-Ezrin-T567 per WB - P15311

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: funzione e localizzazione dell'Ezrina

• L'Ezrina (nota anche come Citovillina, Villina-2, p81) è una proteina di collegamento citoscheletrico di circa 69 kDa codificata dal gene EZR (VIL2).
• Funge da connettore critico tra la membrana plasmatica e il citoscheletro di actina, svolgendo un ruolo essenziale nella formazione dei microvilli epiteliali e degli increspamenti della membrana sulla superficie cellulare apicale.
• Insieme al fattore di scambio nucleotidico della guanina PLEKHG6, l'ezrina è necessaria per la normale macropinocitosi, un processo di endocitosi non selettiva in fase fluida.
• A livello subcellulare, l'ezrina si localizza sulla membrana cellulare apicale, sulle membrane dei microvilli e degli increspamenti, nonché nella corteccia cellulare e nel citoscheletro, riflettendo il suo ruolo dinamico nel rimodellamento membrana-citoscheletro.
• L'espressione tissutale è prominente nei microvilli delle cellule epiteliali intestinali e preferenzialmente negli astrociti dell'ippocampo, della corteccia frontale e di altre regioni cerebrali; è debolmente espressa o assente nei neuroni della maggior parte dei tessuti studiati.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione (un segno distintivo della sua attivazione), l'acetilazione e la S-nitrosilazione, che contribuiscono tutte alla sua versatilità regolatoria in processi cellulari come il mantenimento della forma cellulare, l'adesione e la segnalazione.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Poiché questo anticorpo è fosfo-specifico (T567), assicurare un'inibizione completa delle fosfatasi durante la lisi cellulare/tissutale (ad esempio, utilizzando cocktail di inibitori delle fosfatasi) per preservare il segnale di fosforilazione.
• Per il Western blot, è prevista una banda a circa 69 kDa; considerare l'uso di un controllo positivo come cellule trattate con pervanadato per verificare la fosfo-specificità.
• Per confermare la dipendenza dalla fosforilazione del segnale, trattare i campioni con lambda proteina fosfatasi o eseguire saggi di competizione peptidica con il peptide immunogeno non fosforilato.
• Sebbene ottimizzato per campioni umani, la reattività crociata riportata con topo e ratto suggerisce un'elevata conservazione della sequenza; convalidare l'anticorpo nel proprio sistema modello specifico utilizzando controlli pertinenti.
• Questo anticorpo è raccomandato solo per Western blot (WB); le sue prestazioni in altre applicazioni (es. IHC, IF, IP) non sono state valutate e richiederebbero un'ulteriore convalida.

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