mAb coniglio anti FOSF-FAK-Y397 per WB e ELISA - Q05397

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della FAK

• FAK (Focal Adhesion Kinase 1) è una proteina tirosina chinasi non recettoriale codificata dal gene PTK2, chiamata anche p125FAK o pp125FAK. Agisce come mediatore centrale della segnalazione delle integrine, regolando l'adesione cellulare, la migrazione, la proliferazione e la sopravvivenza.
• Dopo l'attivazione nelle adesioni focali, FAK si autofosforila sulla tirosina 397, creando un sito di legame ad alta affinità per le chinasi della famiglia SRC e avviando cascate di segnalazione a valle fondamentali per il rimodellamento del citoscheletro.
• FAK integra segnali provenienti da diversi recettori, tra cui integrine, recettori per fattori di crescita, GPCR, EPHA2 e recettori per la netrina, accoppiandoli a vie di segnalazione come PI3K/AKT e MAPK/ERK che controllano la crescita e la differenziazione cellulare.
• Attraverso la modulazione localizzata delle GTPasi della famiglia Rho mediate da GEF e GAP, FAK orchestra la riorganizzazione del citoscheletro di actina, l'espansione cellulare e la formazione di protrusioni cellulari.
• Dopo l'attivazione delle integrine, FAK fosforila direttamente NEDD9 (HEF1), contribuendo all'assemblaggio del complesso di segnalazione a valle. Riferimenti correlati: PMID:9360983
>L'isoforma non catalitica 6 (FRNK) agisce come inibitore dominante negativo della segnalazione di FAK, attenuando l'accumulo nucleare di LPXN e la trascrizione dipendente dal fattore di risposta al siero.
• A livello subcellulare, FAK si localizza dinamicamente nelle adesioni focali, nella corteccia cellulare, nel citoplasma perinucleare, nei centrosomi e nel nucleo, riflettendo i suoi molteplici ruoli nella trasduzione del segnale e nell'organizzazione strutturale.
• Le modifiche post-traduzionali, tra cui la fosforilazione su diverse tirosine, serine e treonine, oltre all'acetilazione e all'ubiquitinazione, regolano strettamente l'attività, la stabilità e le interazioni proteiche di FAK.
• Espressa in modo ubiquitario con arricchimento in cellule epiteliali, linfociti e fibroblasti polmonari, FAK è indispensabile per lo sviluppo embrionale, l'angiogenesi e la maturazione del sistema nervoso.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno bersaglia il residuo Y397 fosforilato; per confermare la fosfo-specificità in WB, si consiglia di trattare i campioni con lambda fosfatasi o di incubare l'anticorpo con un peptide bloccante non fosforilato.
• Per applicazioni ELISA, l'uso del peptide fosforilato come controllo positivo e della sua controparte non fosforilata come controllo negativo aiuta a validare la specificità del segnale.
• FAK migra a circa 119 kDa in SDS-PAGE; assicurarsi di utilizzare una percentuale di gel adeguata e tempi di trasferimento prolungati per blot di proteine ad alto peso molecolare.
• Questo anticorpo è stato generato contro la sequenza della FAK umana; la reattività crociata con altre specie non è stata testata in modo estensivo. Validare nel vostro sistema modello specifico se utilizzato al di fuori di campioni umani.

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