Anticorpo policlonale coniglio Phospho-FAK-Y397 per WB, ELISA - Q05397

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della FAK

• La Focal adhesion kinase 1 (FAK, nota anche come PTK2) è una proteina tirosina chinasi non recettoriale che svolge un ruolo centrale nella trasduzione del segnale mediata dalle integrine, regolando la migrazione cellulare, l'adesione, l'espansione cellulare e la riorganizzazione del citoscheletro.
• Codificata dal gene PTK2, la FAK è essenziale per lo sviluppo embrionale precoce, l'angiogenesi, la funzione dei cardiomiociti e lo sviluppo del sistema nervoso (crescita assonale, migrazione neuronale, formazione delle sinapsi).
• Dopo l'attivazione, la FAK subisce l'autofosforilazione in Tyr397, creando un sito di legame ad alta affinità per le chinasi della famiglia SRC; questo evento è fondamentale per l'assemblaggio di complessi di segnalazione che propagano vie a valle come PI3K/AKT e MAPK/ERK.
• Subcellularmente, la FAK si localizza prevalentemente alle adesioni focali, ma anche alla membrana cellulare, nel citoplasma perinucleare, nella corteccia cellulare, sul citoscheletro, sul centrosoma, sul corpo basale dei cigli e nel nucleo, il che riflette i suoi molteplici ruoli di segnalazione.
• L'isoforma 6 (FRNK) manca del dominio chinasi e funziona come inibitore dominante negativo della segnalazione della FAK, attenuando l'accumulo nucleare di LPXN e limitando la trascrizione genica dipendente da SRF.
• La FAK è ampiamente espressa; è rilevata in modo ubiquitario e soprattutto nelle cellule epiteliali, nei linfociti B e T e nei fibroblasti polmonari. Riferimenti correlati: PMID:31630787
• Le principali modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione della tirosina (ad esempio Y397), l'acetilazione e l'ubiquitinazione, che regolano l'attività chinasica, le interazioni proteiche e la stabilità della FAK.
• Questo anticorpo riconosce specificamente la FAK fosforilata in Tyr397, permettendo ai ricercatori di monitorare lo stato di attivazione della FAK negli studi di segnalazione.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato che corrisponde alla regione intorno a Tyr397; si prevede che l'anticorpo riconosca specificamente la forma fosforilata. Validare la specificità trattando i lisati con fosfatasi o utilizzando il blocco con peptide non fosforilato.
• Per Western blot, il peso molecolare previsto è di ~119 kDa. Utilizzare controlli positivi appropriati (ad esempio cellule trattate con pervanadato per indurre la fosforilazione).
• Per ELISA, considerare di rivestire le piastre con il peptide fosforilato e utilizzare un anticorpo anti-FAK totale come controllo di caricamento.
• La reattività incrociata con topo e ratto è riportata, ma consigliamo di eseguire esperimenti di titolazione nel sistema modello pertinente.
• Spedizione con sacchi di ghiaccio; conservare a -20°C al ricevimento per una stabilità a lungo termine.

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