Anticorpo policlonale coniglio Phospho-FAK-Y576/577 per WB, ELISA - Q05397

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di FAK

• La chinasi 1 delle adesioni focali (FAK, PTK2) è una proteina-tirosina chinasi non recettoriale che regola la migrazione cellulare, l'adesione, la diffusione e la riorganizzazione del citoscheletro di actina.
• FAK svolge ruoli essenziali nello sviluppo embrionale, nell'angiogenesi, nella migrazione dei cardiomiociti e nello sviluppo del sistema nervoso.
• L'isoforma 1 a lunghezza intera media la segnalazione dalle integrine, dai recettori dei fattori di crescita e dai GPCR, attivando le vie PI3K/AKT e MAPK.
• L'isoforma 6 (FRNK) manca del dominio chinasi e funziona da inibitore dominante-negativo della fosforilazione e della segnalazione di FAK.
• FAK è localizzato alle adesioni focali, alla membrana cellulare, al citoplasma, ai centrioli e al nucleo, indicando un traffico dinamico.
• La fosforilazione a Tyr576 e Tyr577 nel ciclo di attivazione del dominio chinasi è critica per l'attività catalitica di FAK.
• FAK fosforila substrati a valle come NEDD9 (PubMed:9360983) e SRC per promuovere l'assemblaggio di complessi di segnalazione. Riferimenti correlati: PMID:9360983
• Espressione ubiquitaria; rilevata in linfociti B/T, fibroblasti polmonari e cellule epiteliali (PubMed:31630787). Riferimenti correlati: PMID:31630787

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico che copre Tyr576/Tyr577; la specificità dell'anticorpo dipende dallo stato di fosforilazione.
• Includere inibitori delle fosfatasi nei tamponi di lisi per preservare gli epitopi fosforilati durante la preparazione del campione.
• Per il Western blot, è prevista una banda principale a ~119 kDa; bande aggiuntive possono rappresentare degradazione o reattività crociata.
• Convalidare il rilevamento in linee cellulari attivate (es. fibroblasti stimolati da integrine) dove è indotta la fosforilazione di FAK Y576/577.
• Per l'ELISA, considerare il rivestimento con l'immunogeno fosfopeptide o l'uso di lisati cellulari totali; includere un peptide non fosforilato come controllo negativo.

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