PAb coniglio Phospho-FGFR3-Y724 - P22607

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di FGFR3

• Codificato dal gene FGFR3 (conosciuto anche come JTK4), il recettore 3 del fattore di crescita dei fibroblasti è una tirosin-chinasi transmembrana che funge da recettore sulla superficie cellulare per i fattori di crescita dei fibroblasti.
• Svolge un ruolo fondamentale nella regolazione della differenziazione, proliferazione e apoptosi dei condrociti ed è essenziale per il normale sviluppo scheletrico e la mineralizzazione ossea postnatale.
• Il legame con il ligando attiva multiple vie di segnalazione a valle, tra cui PLCG1, che porta alla produzione di DAG e IP3, e il reclutamento mediato da FRS2 di GRB2, GAB1, PIK3R1 e SOS1, con conseguente attivazione delle vie RAS-MAPK e AKT1.
• Mutazioni che causano l'attivazione costitutiva della chinasi o una maturazione, internalizzazione e degradazione alterate del recettore portano a una segnalazione aberrante e sono associate a displasie scheletriche e tumori; l'isoforma secreta 3 può interferire con la segnalazione FGF.
• La localizzazione subcellulare include la membrana cellulare, le vescicole citoplasmatiche, il reticolo endoplasmatico e una forma secreta; l'espressione è rilevata nel cervello, nel rene e nel testicolo, con un'elevata espressione fetale in rene, polmone, intestino tenue e cervello.
• L'isoforma 2 è rilevata prevalentemente nelle cellule epiteliali, mentre le isoforme 1 e 2 si trovano nelle cellule fibroblastiche; la proteina subisce splicing alternativo e glicosilazione N-linked.
• Classificato come fosfoproteina e recettore tirosin-chinasi, FGFR3 è implicato in patologie come la craniosinostosi, la sordità, il nanismo e la displasia ectodermica.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di circa 88 kDa; si consiglia di utilizzare una percentuale di gel appropriata (ad es. SDS-PAGE all'8-10%) e di ottimizzare le condizioni di trasferimento. Convalidare la rilevazione nel proprio sistema di campioni, poiché le modifiche post-traduzionali e le diverse isoforme possono causare spostamenti di mobilità.
• L'immunogeno è un fosfopetide sintetico corrispondente alla Tyr724 di FGFR3 umano; per confermare la specificità per la fosforilazione, includere un trattamento con lambda fosfatasi o utilizzare un controllo di blocco con peptide non fosforilato nell'ELISA.
• Questo anticorpo presenta reattività crociata con FGFR3 umano e murino; verificare la reattività in altre specie prima dell'uso.
• Per l'ELISA, ottimizzare la concentrazione dell'antigene di coating e la diluizione dell'anticorpo utilizzando il peptide fosforilato come controllo positivo. Si consiglia un protocollo ELISA indiretto standard.

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