Anticorpo policlonale di coniglio Phospho-FOXO4-S197 per WB, IF/ICC, ELISA - P98177

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di FOXO4

• La proteina forkhead box O4 (FOXO4), nota anche come AFX, AFX1 o MLLT7, è un fattore di trascrizione della famiglia forkhead.
• FOXO4 si lega agli elementi di risposta all'insulina (IRE) e regola la via di segnalazione insulinica attivando la trascrizione di bersagli come IGFBP1.
• Svolge la funzione di regolatore negativo del ciclo cellulare ed è coinvolta nei processi di differenziazione cellulare e dello sviluppo.
• FOXO4 downregola l'espressione di HIF1A e sopprime l'attivazione trascrizionale indotta dall'ipossia, collegandola alle vie di sensing dell'ossigeno.
• Nelle cellule staminali embrionali, FOXO4 aumenta l'attività del proteasoma sovraregolando PSMD11, promuovendo l'assemblaggio del proteasoma 26S.
• La proteina si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo; il traffico nucleocitoplasmatico è regolato dalla fosforilazione.
• FOXO4 è ampiamente espressa, con livelli massimi nel cuore, cervello, placenta, polmone, fegato, muscolo scheletrico, rene e pancreas; l'isoforma zeta predomina in fegato, rene e pancreas.
• Le modifiche post-traduzionali chiave includono la fosforilazione (ad esempio alla Ser197), l'acetilazione e l'ubiquitinazione, che modulano la sua attività e la sua stabilità.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico che include la Ser197; per la rilevazione fosfo-specifica, si consiglia di trattare i campioni con lambda fosfatasi per confermare la specificità del segnale.
• Per Western blot è attesa una banda intorno a 54 kDa; verificare il risultato in lisati di tessuti con nota espressione di FOXO4 come fegato o rene.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, monitorare il traffico nucleo-citoplasmatico in condizioni di stimolazione differenti; la stimolazione con insulina o fattori di crescita può alterare la localizzazione.
• Quando si utilizza l'ELISA, rivestire la piastra con il fosfopeptide e confrontare con il peptide non fosforilato per valutare la fosfo-selettività dell'anticorpo.
• È riportata la reattività incrociata con la FOXO4 endogena di topo e ratto; validare sempre nel contesto di specie e tessuto pertinente.

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