Anticorpo policlonale su coniglio Phospho-GAB1 (Tyr659) per WB, ELISA - Q13480

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della proteina 1 associata a GRB2 (GAB1)

• GAB1 (GRB2-associated-binding protein 1) è una proteina adattatrice scaffold che media la segnalazione a valle di molteplici recettori tirosin-chinasi.
• Partecipa alle cascate di segnalazione intracellulari attivate da recettori come FGFR1, EGFR e INSR.
• Coinvolto specificamente nella via di segnalazione MET/HGF. Riferimenti correlati: PMID:29408807
• È un membro della famiglia di adattatori GAB, e condivide motivi strutturali come un dominio di omologia alla pleckstrina e più siti di fosforilazione tirosinica che reclutano proteine contenenti dominio SH2.
• Viene ampiamente fosforilato sui residui tirosinici (inclusa Y659) dopo l'attivazione del recettore, e questa modifica è fondamentale per la sua interazione con gli effettori a valle.
• Le mutazioni in GAB1 sono associate alla sordità non sindromica (DFNB26), evidenziando il suo ruolo nella funzione uditiva.
• Subisce acetilazione e splicing alternativo, che possono modularne l'attività.
• Sono disponibili informazioni sulla struttura 3D, che forniscono informazioni sulla sua architettura molecolare.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato corrispondente ai residui intorno a Tyr659 del GAB1 umano. Assicurati che il tuo sistema di rilevamento sia specifico per la forma fosforilata; consigliamo di usare un anticorpo non specifico per la fosforilazione come controllo.
• Per Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 77 kDa. Usa una percentuale di gel e condizioni di trasferimento appropriate per proteine in questo intervallo di massa. Convalida la specificità della banda utilizzando lisati trattati con fosfatasi o inibitori appropriati.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere usato come reagente di cattura o di rilevazione; si raccomanda di ottimizzare le condizioni di rivestimento e la concentrazione di anticorpo. Includi il peptide fosforilato come controllo positivo.
• La reattività incrociata è stata dimostrata con GAB1 di uomo e topo. Quando usi campioni di topo, tieni conto del potenziale fondo derivante dalle immunoglobuline endogene di topo se utilizzi anticorpi secondari anti-coniglio.
• Poiché GAB1 è coinvolto in molteplici vie di segnalazione (EGFR, INSR, MET/HGF), consigliamo di prevedere un'adeguata stimolazione cellulare con fattori di crescita (ad es. EGF, insulina, HGF) prima della preparazione del campione per indurre la fosforilazione a Tyr659.
• Poiché l'anticorpo è un policlonale di coniglio, è necessario verificare la coerenza tra lotti per applicazioni quantitative critiche.

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