pAb di coniglio per Phospho-Glucocorticoid Receptor-S211 per WB, ELISA - P04150

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del recettore dei glucocorticoidi

• Il recettore dei glucocorticoidi (GR), codificato dal gene NR3C1, appartiene alla sottofamiglia dei recettori nucleari 3, gruppo C, membro 1. Attraverso splicing alternativo e inizio della tradizione alternativo sono generate diverse isoforme, ciascuna con attività trascrizionali e distribuzioni tissutali distinte.

• Il GR agisce come recettore per i glucocorticoidi e funziona attraverso un duplice meccanismo: come fattore di trascrizione che si lega agli elementi di risposta ai glucocorticoidi (GRE) nel DNA nucleare e mitocondriale, e come modulatore di altri fattori di trascrizione. Questo influisce sulle risposte infiammatorie, sulla proliferazione cellulare e sulla differenziazione. Riferimenti correlati: PMID:27120390 PMID:37478846 PMID:28139699

• È coinvolto nel rimodellamento della cromatina (PubMed:9590696) e svolge un ruolo nella degradazione rapida dell'mRNA legandosi alla regione 5' non tradotta (5' UTR) degli mRNA bersaglio e reclutando l'elicasi RNA UPF1 e l'enzima decappante DCP1A, determinando la degradazione dell'RNA. Riferimenti correlati: PMID:9590696 PMID:25775514

• Il GR media l'attivazione e la repressione trascrizionale (PubMed:11435610, PubMed:15769988, PubMed:15866175), promuove l'apoptosi indotta dai glucocorticoidi (PubMed:23303127) e favorisce una corretta segregazione cromosomica durante la mitosi, suggerendo un ruolo oncosoppressore. Riferimenti correlati: PMID:11435610 PMID:15769988 PMID:15866175 PMID:23303127 PMID:25847991

• La distribuzione subcellulare comprende citoplasma, nucleo, mitocondri, fuso mitotico, centrosoma e cromatina, che riflettono il suo shuttle dinamico e le diverse sedi funzionali.

• Il recettore è ampiamente espresso in tessuti come ossa, stomaco, polmone, fegato, colon, mammella, ovaio, pancreas, rene e cuore, il che indica la sua ampia rilevanza fisiologica. Riferimenti correlati: PMID:25847991 PMID:10902803

• Modifiche post-traduzionali come fosforilazione, acetilazione, metilazione e ubiquitinazione regolano la stabilità, la localizzazione subcellulare e l'attività trascrizionale del GR. La fosforilazione in Ser211, all'interno del dominio di transattivazione N-terminale, modula la funzione del recettore.

• Le isoforme presentano diversi gradi di potenza trascrizionale; ad esempio, l'isoforma Beta agisce come inibitore dominante negativo dell'isoforma Alfa, influenzando il legame ormonale e la regolazione genica, mentre altre isoforme contribuiscono al metabolismo del glucosio e alla sensibilità insulinica. Riferimenti correlati: PMID:20484466 PMID:7769088 PMID:8621628 PMID:26711253

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Utilizzare inibitori di fosfatasi durante la preparazione del campione per Western blot per preservare il segnale di fosforilazione in Ser211.
• Prendere in considerazione saggi di blocco con peptide utilizzando il peptide fosforilato e la sua controparte non fosforilata per confermare la specificità dell'anticorpo.
• Per l'ELISA, il peptide immunogeno può essere utilizzato come controllo positivo e per standardizzare le concentrazioni di coating.
• Dato il peso molecolare previsto di ~86 kDa, ottimizzare la percentuale di gel di poliacrilammide e le condizioni di elettroblotting per un trasferimento efficiente delle proteine ad alto peso molecolare.
• Validare le prestazioni dell'anticorpo in linee cellulari umane o di topo stimulate con glucocorticoidi (ad esempio desametasone) per confermare la rilevazione specifica della fosforilazione.

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