Anticorpo policlonale di coniglio Phospho-GRIN2B-Y1474 per WB, ELISA - Q13224

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di GRIN2B

• GRIN2B codifica per la subunità GluN2B (NR2B) dei recettori N-metil-D-aspartato (NMDA), che sono canali cationici eterotetramerici attivati da ligandi, con elevata permeabilità al calcio e blocco voltaggio-dipendente da parte di Mg²⁺. Riferimenti bibliografici: PMID:24272827, PMID:24863970, PMID:26875626
• L'attivazione del canale richiede il legame simultaneo del glutammato a GluN2, della glicina o D-serina a GluN1 e la depolarizzazione della membrana per rimuovere il blocco da Mg²⁺, permettendo l'influsso di Ca²⁺/Na⁺ e l'efflusso di K⁺. Riferimenti bibliografici: PMID:24272827, PMID:24863970, PMID:26875626
• La subunità GluN2B conferisce proprietà al canale distinte, tra cui cinetiche di attivazione/disattivazione, sensibilità al pH, permeabilità al Ca²⁺ e interazioni con modulatori allosterici. Riferimenti bibliografici: PMID:26875626, PMID:28095420, PMID:28126851
• È espresso prevalentemente nella corteccia fronto-parieto-temporale e nelle cellule piramidali dell'ippocampo, con livelli più bassi nei gangli della base, e supporta i ruoli nell'apprendimento, nella memoria e nella cognizione.
• La localizzazione subcellulare comprende la membrana cellulare postsinaptica, le proiezioni dendritiche, gli endosomi tardivi, i lisosomi e il citoscheletro, riflettendo un traffico dinamico e una degradazione regolata.
• La fosforilazione della Ser-1303 da parte di DAPK1 in siti extrasinaptici aumenta l'attività del recettore NMDA, contribuendo al sovraccarico eccitotossico di Ca²⁺ e alla morte neuronale irreversibile in modelli di ictus.
• Le mutazioni in GRIN2B sono associate all'encefalopatia epilettica e dello sviluppo (DEE27, EIEE27) e alla disabilità intellettiva (MRD6), evidenziando i suoi ruoli neurologici critici.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Questo anticorpo fosfo-specifico riconosce la posizione Y1474 di GRIN2B umano; confermare la specificità usando peptide non fosforilato o lisati trattati con fosfatasi come controlli negativi.
• Per il WB, il peso molecolare previsto è 166 kDa; usare condizioni di trasferimento adeguate e considerare l'arricchimento per proteine di membrana se il segnale è basso.
• Includere inibitori di fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare lo stato di fosforilazione.
• Convalidare le prestazioni dell'anticorpo in linee cellulari umane fisiologicamente rilevanti o in tessuti cerebrali noti per esprimere GRIN2B (ad esempio SH-SY5Y, lisati di ippocampo).
• Le applicazioni ELISA possono beneficiare dell'uso di un fosfo-peptide come antigene di rivestimento e del confronto della reattività con la forma non fosforilata.

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