Phospho-GSK3β-S9 Rabbit pAb - P49841

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di GSK3β

• GSK3β (Glicogeno sintasi chinasi-3 beta) è una chinasi proteica serina/treonina costitutivamente attiva che regola negativamente la sintesi del glicogeno, la segnalazione Wnt e i fattori di trascrizione fosforilando bersagli come il glicogeno sintasi, la beta-catenina e JUN. Riferimenti correlati: PMID:11430833, PMID:12554650, PMID:14690523, PMID:1846781
• Nella via Wnt, GSK3β forma un complesso di distruzione con APC e AXIN1, fosforilando la beta-catenina per indirizzarla alla degradazione proteosomiale mediata dall'ubiquitina. Riferimenti correlati: PMID:12554650
• La fosforilazione della proteina associata ai microtubuli TAU da parte di GSK3β in Thr-548 riduce la capacità del TAU di stabilizzare i microtubuli, un processo legato alla formazione di grovigli neurofibrillari nella malattia di Alzheimer. Riferimenti correlati: PMID:14690523
• GSK3β si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nella membrana cellulare, permettendo il suo coinvolgimento in più cascate di segnalazione.
• Viene espresso nel testicolo, timo, prostata e ovaio, con una minore espressione nel polmone, cervello e rene; nei cervelli affetti dalla malattia di Alzheimer, colocalizza con EIF2AK2/PKR e TAU.
• La chinasi regola anche il ritmo circadiano fosforilando i componenti dell'orologio BMAL1 e CLOCK, e modula l'autofagia tramite acetilazione di KAT5/TIP60 in condizioni di digiuno. Riferimenti correlati: PMID:19946213, PMID:28903391, PMID:30704899

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è stato sviluppato contro un peptide fosforilato sintetico corrispondente al GSK3β umano attorno alla Ser9; confermare la specificità fosforo-specifica trattando i campioni con lambda fosfatasi o utilizzando un saggio di competizione con peptide non fosforilato.
• Il peso molecolare previsto di GSK3β è di circa 47 kDa; ottimizzare la percentuale del gel SDS-PAGE e le condizioni di trasferimento per il Western blot per ottenere una chiara separazione delle bande.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), considerare il recupero dell'antigene indotto dal calore in tampone citrato (pH 6.0) e titolare l'anticorpo primario per massimizzare il rapporto segnale/rumore.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), validare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione per il proprio sistema cellulare, poiché GSK3β può localizzarsi in più compartimenti subcellulari.
• È stata riportata reattività crociata con topo e ratto; verificare la reattività nel tessuto o nel lisato cellulare della specie bersaglio prima di esperimenti su larga scala.

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