Anticorpo monoclonale di coniglio Fosfo-HER2/ErbB2-Y1139 per WB ed ELISA - P04626

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di HER2/ErbB2

• HER2 (Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2) è una proteina tirosina chinasi che fa parte di complessi recettoriali di superficie cellulare, richiedendo un corecettore per il legame del ligando. È essenziale per la segnalazione del recettore della neuregulina, sebbene le neureguline non le si leghino direttamente.
• Regola l'estensione e la stabilizzazione dei microtubuli periferici tramite la via MEMO1-RHOA-DIAPH1, portando all'inibizione di GSK3B, all'associazione alla membrana di APC e CLASP2, e alla cattura dei microtubuli da parte di MACF1.
• Nel nucleo, HER2 agisce come fattore di trascrizione, legando il promotore di PTGS2/COX-2 al 5'-TCAAATTC-3' e attivandone la trascrizione, ed è coinvolta nell'attivazione di CDKN1A che coinvolge STAT3 e SRC.
• Migliora anche la trascrizione dell'rRNA da parte dell'RNA Pol I, promuovendo la sintesi proteica e la crescita cellulare.
• A livello subcellulare, HER2 si localizza sulla membrana cellulare, sui ruffles, negli endosomi precoci, nel citoplasma (perinucleare) e nel nucleo, in linea con i suoi duplici ruoli di segnalazione e trascrizionale.
• Specificità tissutale: Espressa in vari tessuti tumorali inclusi tumori mammari primari e tumori di intestino tenue, esofago, rene e bocca.
• Caratteristiche chiave: È una glicoproteina di membrana di tipo I a passaggio singolo con attività chinasica, contenente un sito di legame per l'ATP, siti di fosforilazione e legami disolfuro. È coinvolta in riarrangiamenti cromosomici, splicing alternativo e varianti patologiche.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'anticorpo è stato generato contro un peptide sintetico fosforilato che circonda la tirosina 1139 di HER2 umano. Per il Western blot, considerare l'uso di condizioni di bloccaggio specifiche per la fosforilazione e appropriati inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare l'epitopo fosfo-.
• Considerando il peso molecolare previsto di 138 kDa, assicurare adeguate condizioni di separazione su gel e di trasferimento per proteine ad alto peso molecolare nel Western blot.
• Per l'ELISA, è consigliabile validare l'anticorpo con peptidi fosforilati e non fosforilati per confermarne la specificità. Includere appropriati controlli positivi e negativi, come lisati di linee cellulari che sovraesprimono HER2 e trattate con fosfatasi.
• La reattività incrociata è segnalata per l'umano; verificare la reattività con altre specie se necessario. Poiché HER2 è un recettore transmembrana, considerare l'uso di frazioni arricchite di membrana per una migliore rilevazione.

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