Anticorpo monoclonale di coniglio Fosfo-Istone H2AX-S139 per WB, IP, IF/ICC, ELISA - P16104

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H2AX

• L'Istone H2AX (H2A.X) è una variante dell'istone H2A che sostituisce l'H2A convenzionale in un sottoinsieme di nucleosomi.
• Svolge un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, riparazione del DNA, replicazione del DNA e stabilità cromosomica compattando il DNA in cromatina e regolandone l'accessibilità attraverso modifiche post-traduzionali.
• La fosforilazione in Ser139 (γ-H2AX) è fondamentale per il riconoscimento delle rotture a doppio filamento del DNA (DSB) e per il reclutamento della macchina di riparazione del DNA, rendendola un marcatore chiave per il danno al DNA.
• Necessaria per l'arresto del ciclo cellulare mediato da checkpoint in risposta a basse dosi di radiazioni ionizzanti e per un'efficiente riparazione delle DSB.
• Localizzata nel nucleo e associata ai cromosomi.
• Soggetta a molteplici modifiche post-traduzionali tra cui acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che modulano finemente la sua funzione nella risposta al danno al DNA.
• Il gene H2AX (H2AFX) è un membro della famiglia genica dell'istone H2A ed è ampiamente conservato.
• Il suo peso molecolare previsto è di circa 15 kDa, coerente con la sua tipica migrazione in SDS-PAGE.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato intorno a S139 dell'Istone H2AX umano; per la rilevazione fosfo-specifica, considerare l'inclusione di inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione.
• Per validare la specificità dell'anticorpo per la forma fosforilata, confrontare i segnali da lisati non trattati vs. trattati con fosfatasi.
• Per il Western blot, è attesa una banda intorno a 15 kDa; assicurarsi di utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati.
• Nell'immunofluorescenza, i foci γ-H2AX sono un classico marcatore di rotture a doppio filamento del DNA; considerare di indurre danno al DNA con agenti come l'etoposide o radiazioni ionizzanti per migliorare il segnale.
• Per l'ELISA, utilizzare un peptide fosforilato come antigene di rivestimento e una controparte non fosforilata come controllo negativo.

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