Anticorpo policlonale di coniglio Fosfo-HSF1-S326 per WB, ELISA - Q00613

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di HSF1 (Heat Shock Factor 1)

• HSF1 funziona come un fattore di trascrizione indotto da stress che guida l'espressione delle proteine da shock termico (HSP) per proteggere le cellule dai danni. Nelle cellule non stressate, è mantenuto come un monomero inattivo in un complesso con HSP90; in seguito a stress, si trimerizza, lega gli elementi di shock termico (HSE) e attiva la trascrizione dei geni HSP. Riferimenti correlati: PMID:11447121, PMID:12659875, PMID:12917326, PMID:11583998, PMID:16278218, PMID:9727490, PMID:10359787
• In seguito a stress da shock termico, HSF1 forma un complesso associato alla cromatina con TTC5/STRAP e p300/EP300 per stimolare la trascrizione HSR, aumentando così la sopravvivenza cellulare. Riferimenti correlati: PMID:18451878
• HSF1 attiva la trascrizione di FOXR1, che a sua volta regola positivamente le chaperonine da shock termico HSPA1A e HSPA6 e la reduttasi antiossidante DHRS2. Riferimenti correlati: PMID:34723967
• Oltre all'attivazione trascrizionale, HSF1 reprime la trascrizione di c-fos indotta da Ras, promuove la processazione del pre-mRNA 3'-estremità di HSP70 e media l'esporto nucleare dell'mRNA di HSP70. Riferimenti correlati: PMID:9341107, PMID:14707147, PMID:17897941
• HSF1 svolge un ruolo nella progressione mitotica e agisce come regolatore negativo della riparazione del DNA tramite non-homologous end joining (NHEJ). Riferimenti correlati: PMID:18794143, PMID:26359349
• HSF1 è coinvolto nella riattivazione dell'HIV-1 latente legandosi al promotore LTR virale e reclutando fattori di allungamento trascrizionale.
• HSF1 si localizza nel nucleo, nel citoplasma e si associa ai poli del fuso, ai centrosomi e ai cinetocori. È regolato dalla fosforilazione in più siti, incluso la serina 326, che è critica per la sua attivazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è stato generato contro un fosfopeptide sintetico che comprende la serina 326 di HSF1 umano e riconosce specificamente la forma fosforilata. Includere inibitori delle fosfatasi nei buffer di lisi per proteggere l'epitopo.
• Per il WB, il peso molecolare atteso è di ~57 kDa. Utilizzare lisati di cellule umane trattate con shock termico vs. non trattate come controlli positivo/negativo. Considerare di trattare i campioni con fosfatasi lambda per confermare la specificità per la fosforilazione.
• Nell'ELISA, ottimizzare la concentrazione dell'antigene di rivestimento e la diluizione dell'anticorpo. Abbinare a un sistema di rilevamento appropriato per l'analisi quantitativa.
• Validare la reattività incrociata nel proprio sistema sperimentale (campioni umani attesi).

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