Phospho-INSR-Y1146/IGF1R-Y1131 Rabbit pAb per WB, ELISA - P06213 / P08069

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di INSR e IGF1R

• Il recettore dell'insulina (INSR) è un recettore tirosin chinasi che media le azioni pleiotropiche dell'insulina dopo il legame del ligando.
• INSR attivato fosforila substrati intracellulari (IRS1-4, SHC), portando all'attivazione di due principali vie di segnalazione: PI3K-AKT (azioni metaboliche) e Ras-MAPK (crescita cellulare e differenziazione).
• La via PI3K-AKT promuove il trasloco del trasportatore di glucosio SLC2A4/GLUT4, effetti anti-apoptotici (tramite fosforilazione di BAD) e la segnalazione mTORC1; la via Ras-MAPK regola l'espressione genica e collabora con PI3K per la crescita cellulare.
• INSR forma recettori ibridi con IGF1R. I recettori ibridi contenenti l'isoforma Lunga di INSR sono attivati con alta affinità da IGF1, bassa affinità da IGF2, e non in modo significativo dall'insulina (PubMed:12138094); quelli con l'isoforma Corta sono attivati da IGF1, IGF2 e insulina. Un altro studio ha suggerito caratteristiche di legame simili per entrambi i tipi ibridi (PubMed:16831875). Riferimenti correlati: PMID:12138094 PMID:16831875
• La localizzazione subcellulare include la membrana cellulare, i endosomi tardivi e i lisosomi, riflettendo l'internalizzazione e il traffico del recettore.
• L'isoforma Lunga e Corta sono prevalentemente espresse nei tessuti bersaglio dell'insulina (fegato, tessuto adiposo, muscolo scheletrico) e trovate anche in vari altri tessuti e tumori; l'isoforma Corta è preferenzialmente espressa nelle cellule fetali.
• INSR subisce autofosforilazione a residui tirosina multipli, inclusi Y1146, che è critico per la propagazione del segnale a valle.
• Le caratteristiche strutturali chiave includono lo splicing alternativo, domini extracellulari di legame del ligando, un'elica transmembrana e un dominio intracellulare tirosin chinasi.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il rilevamento specifico fosfo-specifico, includere inibitori delle fosfatasi nei tamponi di lisi e validare la specificità trattando i campioni con fosfatasi alcalina o utilizzando la competizione con peptide non fosforilato.
• Utilizzare controlli positivi appropriati, come linee cellulari stimolate con insulina, e monitorare le bande vicino a 155 kDa nel Western blot.
• Per ELISA, ottimizzare le condizioni di rivestimento e confermare la linearità dell'analisi con standard di peptide fosforilato.
• Considerare che l'anticorpo può riconoscere sia le forme fosforilate di INSR che di IGF1R; verificare l'identità del bersaglio nel proprio sistema.

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