Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Fosfo-IRE1-S724 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O75460

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di IRE1

• IRE1 (ERN1) è un enzima bifunzionale che combina un dominio chinasi serina/treonina e un dominio endoribonucleasi, fungendo da sensore principale dello stress del RE e della risposta a proteine non correttamente ripiegate (UPR). Riferimenti correlati: PMID:11175748, PMID:11779464, PMID:12637535
• In condizioni basali, i monomeri di IRE1 sono mantenuti inattivi dal legame con la chaperonina del RE BiP/HSPA5. L'accumulo di proteine mal ripiegate innesca il rilascio di BiP, permettendo l'omodimerizzazione di IRE1 e la trans-autofosforilazione. Riferimenti correlati: PMID:21317875
• L'endoribonucleasi di IRE1 attivata bersaglia specificamente l'mRNA di XBP1, rimuovendo un introne di 26 nucleotidi per produrre XBP1 spliciato (XBP1s). Riferimenti correlati: PMID:11779464, PMID:21317875, PMID:24508390
• XBP1 spliciato codifica per un potente fattore di trascrizione che guida l'espressione di geni target dell'UPR, promuovendo il ripiegamento proteico e la degradazione associata al RE. Riferimenti correlati: PMID:11779464, PMID:21317875, PMID:24508390
• IRE1 media anche il traffico non convenzionale indotto da stress del RE di CFTR alla membrana plasmatica, dipendente da GORASP2, che coinvolge la ridistribuzione di SEC16A. Riferimenti correlati: PMID:21884936, PMID:28067262
• Studi di immunofluorescenza localizzano IRE1 prevalentemente alla membrana del reticolo endoplasmatico.
• IRE1 è espresso ubiquitariamente, con livelli particolarmente elevati nel tessuto pancreatico.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per la rilevazione fosfo-specifica nel western blot, includere inibitori delle fosfatasi nei buffer di lisi per preservare il segnale di fosforilazione in Ser724.
• Utilizzare un anticorpo anti-IRE1 non fosforilato come controllo di caricamento per normalizzare i livelli di proteina fosforilata e totale.
• Il peso molecolare previsto è di circa 110 kDa; utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati per una conferma accurata della dimensione.
• Per IHC-P e IF/ICC, le condizioni di recupero dell'antigene e di permeabilizzazione potrebbero richiedere ottimizzazione per diversi tipi di campione.
• Sebbene l'anticorpo sia indicato per WB, IHC-P, IF/ICC ed ELISA, le diluizioni ottimali e i tempi di incubazione devono essere determinati sperimentalmente nel sistema modello rilevante.

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