Fosfo-IRF3-S386 pAb di coniglio per WB e ELISA - Q14653

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di IRF3

• Principale regolatore trascrizionale delle risposte immunitarie dipendenti dall'interferone (IFN) di tipo I, controllando l'espressione di IFN-α/β e dei geni stimolati dall'interferone (ISG) legandosi ai promotori degli elementi di risposta stimolati dall'interferone (ISRE).
  Riferimenti correlati: PMID:11846977, PMID:16846591, PMID:16979567, PMID:20049431

• Esiste in una forma monomerica inattiva nel citoplasma delle cellule non infette; dopo l'infezione virale o la segnalazione TLR, le chinasi IKBKE e TBK1 fosforilano IRF3 a residui chiave inclusi S386, inducendo un cambiamento conformazionale, dimerizzazione e translocazione nucleare.
  Riferimenti correlati: PMID:22394562, PMID:25636800, PMID:27302953

• Nel nucleo, IRF3 fosforilato si associa a CREBBP per formare il complesso fattore 1 attivato da dsRNA (DRAF1), che attiva potentemente la trascrizione dei geni IFN di tipo I e ISG.
  Riferimenti correlati: PMID:16154084, PMID:33440148

• Gioca un ruolo critico sia nelle fasi precoci che tardive dell'induzione dei geni IFN e può attivare programmi di espressione genica distinti nei macrofagi, inclusa la capacità di indurre apoptosi significativa nei macrofagi primari.
  Riferimenti correlati: PMID:16846591, PMID:25609812

• Fattore di trascrizione chiave nella risposta IFN durante l'infezione da SARS-CoV-2, mediando la difesa antivirale.
  Riferimenti correlati: PMID:33440148

• La localizzazione subcellulare spazia tra citoplasma, nucleo e mitocondrio; il reclutamento mitocondriale (tramite TOMM70:HSP90AA1) può innescare l'apoptosi attraverso BAX.
  Riferimenti correlati: PMID:25609812

• Espresso costitutivamente in una vasta gamma di tessuti; il gene subisce splicing alternativo e la proteina è soggetta ad acetilazione, fosforilazione e coniugazione simile all'ubiquitina.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico corrispondente al sito di fosforilazione S386; si consiglia di utilizzare inibitori delle fosfatasi durante la lisi del campione per preservare il segnale di fosforilazione.
• Per il Western blot, è prevista una banda intorno a 47 kDa; includere un controllo di blocco con peptide non fosforilato per confermare la specificità fosfo.
• Nell'ELISA, può essere utilizzata la rivestimento diretto con il fosfopeptide o la cattura del bersaglio dai lisati; si consiglia la titolazione dell'anticorpo per un rapporto segnale-rumore ottimale.

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