Anticorpo Policlonale di Coniglio Fosfo-IRS1-S312 per Western Blot - P35568

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di IRS1

• Il substrato del recettore dell'insulina 1 (IRS1) è una proteina adattatrice di segnalazione critica che media la trasduzione del segnale dal recettore dell'insulina (INSR) e dal recettore del fattore di crescita insulino-simile I (IGF1R), svolgendo ruoli essenziali nello sviluppo, nella crescita, nell'omeostasi del glucosio e nel metabolismo lipidico. Riferimenti correlati: PMID:7541045, PMID:19639489
• Dopo la fosforilazione da parte del recettore dell'insulina attivato, IRS1 funge da proteina di ancoraggio/impalcatura, reclutando proteine contenenti il dominio SH2 come la subunità regolatoria p85 della PI3K, NCK1, NCK2, GRB2 e SHP2 per propagare i segnali a valle. Riferimenti correlati: PMID:11171109, PMID:8265614
• Il reclutamento del complesso GRB2-SOS1 porta all'attivazione della cascata Ras/Raf/MEK/MAPK, mentre l'attivazione della via PI3K/AKT media la maggior parte degli effetti metabolici dell'insulina; entrambe le vie cooperano per regolare l'espressione genica, la crescita cellulare e la differenziazione.
• IRS1 agisce anche come regolatore positivo della via di segnalazione Wnt/β-catenina sopprimendo la degradazione di DVL2 mediata dall'autofagia, promuovendo così la proliferazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:24616100
• IRS1 si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo, in linea con i suoi ruoli nella segnalazione e nella regolazione genica.
• La proteina è soggetta a estese modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione, ubiquitinazione e S-nitrosilazione, che modulano finemente la sua attività e stabilità; parole chiave includono Fosfoproteina, Coniugazione Ubl e Diabete mellito.
• Mutazioni o disregolazione di IRS1 sono associate a resistenza insulinica e diabete di tipo 2, sottolineandone l'importanza nelle malattie metaboliche.
• IRS1 umano ha un peso molecolare calcolato di circa 131.6 kDa e migra a circa 132 kDa su SDS-PAGE.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosfo-specifico corrispondente alle sequenze circostanti la serina 312 di IRS1 umano. La specificità per la forma fosforilata dovrebbe essere confermata; considerare l'uso di lisati trattati con fosfatasi o il blocco con peptide non fosforilato nella propria validazione.
• La rilevazione di IRS1 in Western blot produce tipicamente una banda intorno ai 132 kDa; utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e considerare il comportamento di migrazione noto della proteina.
• Per IRS1 fosforilata, il trattamento delle cellule con insulina o IGF-1 prima della lisi dovrebbe potenziare il segnale; ottimizzare tempo e concentrazione di stimolazione per il proprio sistema.
• Questo anticorpo mostra reattività crociata con IRS1 di topo e ratto secondo i dati del fornitore; validare nel sistema di campioni rilevante utilizzando controlli appropriati.
• Data la suscettibilità degli epitopi fosforilati, evitare stripping e ri-sondaggio aggressivi delle membrane; se necessario, verificare che il segnale fosforilato non vada perso.

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