pAb di coniglio Phospho-IRS1-S636/639 per WB, ELISA - P35568

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di IRS1

• Il substrato del recettore dell'insulina 1 (IRS1, noto anche come HIRS-1) è una proteina adattatrice di segnalazione chiave che media la trasduzione del segnale dal recettore dell'insulina (INSR) e dal recettore del fattore di crescita insulino-simile I (IGF1R), svolgendo ruoli cruciali nello sviluppo, nella crescita, nell'omeostasi del glucosio e nel metabolismo lipidico. Riferimenti correlati: PMID:7541045, PMID:33991522, PMID:38625937, PMID:19639489
• Dopo la fosforilazione da parte dei recettori attivati, IRS1 funge da impalcatura che recluta proteine contenenti dominio SH2 come la subunità regolatoria p85 della PI3K, GRB2, NCK1/2 e SHP2, propagando così le cascate di segnalazione a valle. Riferimenti correlati: PMID:11171109, PMID:8265614
• Il reclutamento di GRB2 porta all'attivazione della via Ras/Raf/MEK/MAPK, che coopera con la via PI3K/AKT per regolare l'espressione genica, la crescita cellulare e la differenziazione.
• IRS1 regola positivamente la via di segnalazione Wnt/beta-catenina sopprimendo la degradazione di DVL2 mediata dall'autofagia, promuovendo così la proliferazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:24616100
• La proteina si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo, coerentemente con i suoi ruoli nella trasduzione del segnale e nella regolazione trascrizionale.
• IRS1 è ampiamente fosforilato su più residui di serina/treonina e tirosina; la sua disregolazione è associata all'insulino-resistenza e al diabete mellito (Parola chiave: Diabete mellito, Fosfoproteina).

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Questo anticorpo riconosce specificamente IRS1 fosforilato alle posizioni Ser636 e Ser639; assicurati che i campioni siano adeguatamente stimolati (ad esempio con insulina) per indurre la fosforilazione prima della rivelazione.
• Per il Western blotting, consigliamo di utilizzare buffer di lisia specifici per fosfoproteine e di aggiungere inibitori di fosfatasi per preservare lo stato di fosforilazione.
• Valida la specificità dell'anticorpo confrontando i segnali nei campioni trattati con fosfatasi rispetto a quelli non trattati, oppure mediante blocco peptidico con l'immunogeno non fosforilato.
• Il peso molecolare previsto di IRS1 è di 132 kDa; utilizza una percentuale di gel appropriata e una membrana di trasferimento ottimizzata per proteine ad alto peso molecolare.
• Questo anticorpo è stato validato per WB e ELISA; altre applicazioni potrebbero richiedere un'ulteriore ottimizzazione.

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