Anticorpo monoclonale coniglio Phospho-JAK2-Y1007/1008 per WB, ELISA - O60674

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di JAK2

• JAK2 è una tirosin-chinasi proteica non transmembrana che fosforila i recettori di citochine di tipo I (es. GHR, EPOR, MPL) e di tipo II (es. recettori IFN, interleuchine), innescando cascate di segnalazione a valle. Riferimenti correlati: PMID:15690087 PMID:15899890 PMID:7615558
• Media segnalazioni essenziali nell'immunità innata e adattativa, ed è coinvolta in processi come crescita cellulare, sviluppo, differenziazione e modificazioni degli istoni.
• Dopo il legame del ligando, JAK2 fosforila residui tirosinici specifici sulle code citoplasmatiche del recettore, creando siti di ancoraggio per le proteine STAT; successivamente fosforila le STAT, che dimerizzano e si traslocano nel nucleo per regolare la trascrizione genica. Riferimenti correlati: PMID:9618263
• Nell'eritropoiesi, la stimolazione con EPO porta all'autofosforilazione e attivazione di JAK2, all'associazione con EPOR e alla successiva fosforilazione e attivazione di STAT5, che promuove la trascrizione di geni legati all'eritropoiesi. Riferimenti correlati: PMID:9657743
• Nel nucleo, JAK2 fosforila l'istone H3 in Tyr-41 (H3Y41ph), una modifica che esclude HP1α dalla cromatina, svolgendo così un ruolo diretto nella regolazione epigenetica. Riferimenti correlati: PMID:19783980
• La localizzazione subcellulare include il sistema endomembranale, il citoplasma e il nucleo, in linea con le sue funzioni duali di segnalazione citoplasmatica e nucleare.
• Espressa in modo ubiquitario nella maggior parte dei tessuti, riflettendo il suo ampio ruolo nella segnalazione delle citochine.
• Le caratteristiche strutturali chiave includono un dominio SH2 e domini chinasi-like in tandem; classificata come tirosin-proteina chinasi, regolatore della cromatina e proto-oncogene.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'anticorpo è stato generato contro un peptide sintetico fosforilato che comprende Y1007 e Y1008; ci si aspetta che riconosca specificamente JAK2 solo quando fosforilata in questi siti del loop di attivazione.
• Per il WB, considerare l'uso di cocktail di inibitori della fosfatasi durante la preparazione del campione e l'utilizzo di controlli positivi/negativi appropriati (es. cellule stimolate vs. non stimolate) per confermare la specificità per la fosforilazione.
• Il peso molecolare previsto di JAK2 è ~131 kDa; verificare la migrazione della banda rispetto ai marcatori di peso molecolare e tenere conto di possibili modificazioni post-traduzionali.
• Il pre-trattamento dei lisati cellulari con fosfatasi lambda può servire come controllo utile per determinare la specificità per la fosforilazione.
• Per l'ELISA, seguire i protocolli standard di immobilizzazione e rilevamento; l'abbinamento con un anticorpo per JAK2 totale può consentire la normalizzazione dei livelli di fosforilazione.

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